HPLC
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceWaters
Význam tématu
Analýza nečistot účinných látek je zásadní pro ověření kvality farmaceutických produktů a dodržení požadavků U.S. Pharmacopeia. Přenos kompendiálních USP metod mezi různými chromatografickými platformami a jejich adaptace na moderní UPLC systémy zvyšuje propustnost laboratoře, snižuje spotřebu rozpouštědel i dobu analýzy a umožňuje unifikovat kontrolu kvality v globálním měřítku.
Cíle a přehled studie
Cílem studie bylo demonstrovat:
- přenos dvou USP metod pro stanovení časných a pozdních nečistot ziprasidon HCl mezi konvenčním HPLC (Alliance 2695) a UPLC (ACQUITY UPLC H-Class),
- konverzi těchto metod do UPLC formátu s minimálním dopadem na separaci,
- ověření shody s USP požadavky na systémovou vhodnost a reprodukovatelnost napříč laboratořemi.
Použitá metodika a instrumentace
Standardní a vzorkové roztoky byly připraveny ve směsi methanol/voda/koncentrovaná HCl (20:5:0,01) dle USP monografie. Výzvou bylo minimalizovat deformaci píků při injekci silného organického ředidla do nízkoobjemového UPLC systému. To vyžadovalo přidání 50 µL post-injektorového objemu.
Instrumentace:
- Alliance 2695 HPLC se 2489 UV/Visible detektorem
- ACQUITY UPLC H-Class s TUV detektorem
- Kolony XBridge C8 4,6×150 mm, 5 µm a ACQUITY UPLC BEH C8 2,1×50 mm, 1,7 µm
- Empower 3 Software
Hlavní výsledky a diskuse
Přímá injekce roztoků s 80 % methanolem do UPLC vedla k frontingu a špatné symetrii píků. Snížení injekčního objemu sice mírně zlepšilo tvar píků, ovšem na úkor citlivosti. Optimálním řešením bylo navýšení post-injektorového objemu, což umožnilo lepší promíchání vzorku s mobilní fází a obnovilo požadované rozlišení a opakovatelnost. Konverze na UPLC zkrátila dobu analýzy časných nečistot z 6 na 2,4 minuty a pozdních z 8 na 4,5 minuty při zachování systémové vhodnosti podle USP.
Přínosy a praktické využití metody
Implementace UPLC verzí USP metod přinesla:
- zvýšení throughputu QC laboratoří díky zkrácení času analýzy o 63 % (časné nečistoty) a 58 % (pozdní nečistoty),
- úsporu mobilní fáze a snížení nákladů na rozpouštědla o 93 %,
- rychlejší rozhodovací procesy pro uvolnění finálních produktů,
- možnost konzistentní aplikace metod napříč různými laboratořemi a CRO/CMO partnery.
Budoucí trendy a možnosti využití
- rozšíření UPLC adaptací pro další kompendiální metody různých léčiv,
- automatizace a standardizace přenosu metod pomocí softwarových nástrojů (např. Columns Calculator),
- další miniaturizace a integrace vysokopropustných platforem pro rozsáhlé screeningové studie,
- kombinace UPLC s hmotnostní spektrometrií pro multi-atributové analýzy.
Závěr
Úpravou post-injectorového objemu bylo možné spolehlivě přenést USP HPLC metody pro stanovení nečistot ziprasidon HCl mezi systémy Alliance HPLC a ACQUITY UPLC H-Class a úspěšně je konvertovat na UPLC. Tato adaptace přináší významné zkrácení doby analýzy a úspory rozpouštědel bez kompromisů v kvalitě separace a splnění farmakopeálních požadavků. Reprodukovatelnost metody v různých laboratořích potvrzuje její robustnost pro globální použití.
Reference
- USP Monograph Ziprasidone HCl, USP35-NF29, The United States Pharmacopeia Convention, official May 1, 2012.
- USP General Chapter <621> Chromatography, USP35-NF30, The United States Pharmacopeia Convention, official December 1, 2012.
- Jones MD, Alden P, Fountain KJ, Aubin A. Implementation of Methods Translation between Liquid Chromatography Instrumentation. Waters Application Note 720003721en, September 2010.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.