Detection and Quantitation of Nitrosamine Impurities in Drug Substances by LC-HRMS on LCMS-9030

Význam tématu

Detekce a kvantifikace nitrosaminních impurit v léčivých látkách je klíčová vzhledem k jejich karcinogenním rizikům a přísným regulačním limitům stanoveným úřady FDA a dalšími agenturami. Vysoce citlivé a selektivní metody hmotnostní spektrometrie pomáhají zajišťovat bezpečnost léčiv a shodu s přijatelnou denní dávkou (

Cíle a přehled studie / článku

Studie popisuje vývoj ortogonální LC-HRMS metody na systému Shimadzu LCMS-9030 pro současnou analýzu až osmi N-nitrosaminů ve farmaceutických substancích. Cílem je optimalizovat cílený MS/MS (TOF) přístup s úzkým oknem izolace v kvadrupólu a mass tolerance ±15 ppm pro spolehlivou kvantifikaci.

Použitá metodika

Vzorky substancí (metformin, losartan, candesartan) byly připraveny podle FDA protokolů rozpouštěním, vortexováním, odstředěním a filtrací. Kalibrační řady směsí nitrosaminů v rozsahu 0,2–100 ng/mL (NDBA: 0,1–50 ng/mL) vznikly ředěním v 15:85 MeOH:H2O + 0,1 % kyseliny mravenčí. Cílené MS/MS spektrum sbírá TOF analyzátor při nastavené kolizní energii a izolaci ±2 m/z pro každý analyť, což zlepšuje citlivost oproti plnému TIC záznamu.

Použitá instrumentace

• Shimadzu LCMS-9030 Q-TOF systém
• DUIS ESI rozhraní (4,0 kV), corona jehla 4,5 kV
• Kolonka Shim-pack Solar C18 (4,6 × 250 mm, 5 µm)
• Mobilní fáze A: voda + 0,1 % HCOOH, B: methanol + 0,1 % HCOOH

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrace pro všechny analyty jsou lineární (R² > 0,99) v širokém rozsahu, LOQ dosahují 0,2–1 ng/mL v roztocích a odpovídajících ppm v matricích substancí. Opakovatelnost (RSD) se pohybuje mezi 1,9–15,2 % při nízkých koncentracích. Ukázalo se, že mass tolerance do 15 ppm (NDPA 20 ppm) odlišuje cílové ionty od interferencí, např. izotopního signálu DMF a NDMA.

Přínosy a praktické využití metody

• Simultánní analýza osmi N-nitrosaminů jedním během
• Vysoká citlivost a selektivita díky cílenému MS/MS
• Aplikace na kontroly kvality metforminu, losartanu a candesartanu

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření panelu analyzovaných nitrosaminů, automatizace přípravy vzorků, integrace s dalšími separačními technikami (UHPLC) a využití softwarových nástrojů pro pokročilou datovou analýzu a screening neznámých impurit.

Závěr

Popsaná metoda na LCMS-9030 Q-TOF pro cílenou detekci N-nitrosaminů nabízí robustní, citlivé a rychlé řešení pro monitorování karcinogenních impurit ve farmaceutických surovinách v souladu s regulačními požadavky.

Reference

• Rane S. et al. Quantitation of 6 Nitrosamines in 5 Sartans by LC-MS/MS, USP <1469>
• US FDA 05/21/2019: LC-HRMS Method for Determination of Six Nitrosamines in ARB Drugs
• US FDA 06/03/2020: LC-ESI-HRMS Method for Nitrosamine Impurities in Metformin
• Yang J. et al. The AAPS Journal 2020;22:89