Quantitation of 7 Nitrosaminesin API by HSGC-MS/MS as per proposed USP General Chapter <1469>

Význam tématu

Nitrosaminy patří mezi vysoce potentní mutagenní karcinogeny, často nazývané „cohort of concern“.
Jejich výskyt ve farmaceutických výrobcích zejména v sartanech vyvolal regulační opatření a nutnost stanovit přísné limity množství.
Dnešní požadavky USP <1469> a USFDA kladou důraz na detekci jednotlivých i souhrnných nitrosaminů pod 0,03 ppm.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a validovat vysoce senzitivní HSGC-MS/MS metodu pro kvantifikaci sedmi nitrosaminů v API losartanu dle navrhované USP <1469> procedury 2.
Studie porovnává dosažené LOQ s limity USP a demonstruje splnění či překonání regulatorních požadavků.

Použitá instrumentace

• GCMS-TQ8050 NX se systémem HS-20 (headspace autosampler)
• Kolona SH-Stabilwax, 30 m × 0,32 mm ID, 1,0 µm filmová tloušťka
• Electron Ionization (EI), ion source 250 °C, CID plyn argon
• Headspace pec 110 °C, tlak 20 psi, doba ekvilibrace 10 min

Použitá metodika

• MRM přechody pro sedm nitrosaminů a vnitřní standard
• GC parametry: split injection, helium 1,8 mL/min, program teplot 45–240 °C
• Headspace: vzorek (200 mg API + 100 mg imidazolu), 1 mL vnitřního standardu, 1 mL methanol
• Kalibrace v rozsazích 2,5–1600 ppb dle analyzátu
• LOQ stanovená na základě poměru signál/šum (S/N) a % RSD (<15 %)

Hlavní výsledky a diskuse

• LOQ nitrosaminů: NDMA, NDEA, NEIPA, NDIPA 2,5 ppb; NDPA 10 ppb; NDBA 5 ppb; NMPrZ 25 ppb
• Kalibrační křivky s korelačním koeficientem r² > 0,999 pro všechny analyty
• Reduktabilita při LOQ < 15 % RSD (n = 6)
• Spiked recovery test potvrdil 90–127 % recuperaci ve vzorku losartanu
• Metoda překonává požadavky USP <1469> až 8× vyšší citlivostí

Přínosy a praktické využití metody

• Rychle použitelná metoda pro QA/QC laboratoře v API a FPP kontrolách
• Automatizace pomocí headspace minimalizuje manipulaci a riziko kontaminace
• Metoda zajišťuje včasné odhalení nitrosaminů pod regulatorními limity

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další farmaceutické látky a matricové matice
• Integrace s pokročilými datovými nástroji pro sledování stability a kontaminací
• Vývoj screeningových metod pro rychlou detekci neočekávaných nitrosaminů

Závěr

Navržená HSGC-MS/MS metoda s GCMS-TQ8050 NX poskytuje vysokou citlivost, přesnost a opakovatelnost pro stanovení sedmi nitrosaminů v losartanovém API.
Metoda splňuje či překonává požadavky navrhovaného USP <1469> a umožňuje spolehlivou kontrolu karcinogenních nečistot.

Reference

• USP General Chapter <1469> Nitrosamines in the Drug Substance and Drug Product
• USFDA Guidance on Acceptable Intake Limits for Nitrosamines