ANALYSIS OF SULFONAMIDES AND QUINOLONES IN SHRIMP USING THE AGILENT 6460 TRIPLE QUADRUPOLE LC/MS

Význam tématu

Farmaceutické rezidua sulfonamidových a chinolonových antibiotik v mořských plodech představují potenciální riziko pro lidské zdraví i životní prostředí. Přesná a citlivá analýza těchto látek ve složitých matricích, jako je kreveta, je klíčová pro dodržování legislativních limitů (MRL) a prevenci vzniku antibiotické rezistence.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout a optimalizovat analytickou metodu pro stanovení 25 sulfonamidů a chinolonů v homogenizovaných vzorcích krevety. Studie demonstruje použití rychlé extrakce QuEChERS, chromatografii UHPLC a selektivní detekci pomocí triple kvadrupólu LC/MS v režimu pozitivního ESI.

Použitá metodika

• Extrakce vzorku: QuEChERS s použitím kyseliny mravenčí v acetonitrilu a Bond Elute AOAC kitů, odstředění a disperzivní SPE úprava.
• Kalibrace: Matricky navázané standardy v rozsahu 2,5–100 ppb (1,25–50 pg na kolonu).
• UHPLC podmínky: Kolona C18 (3,0 × 100 mm, 1,8 μm), mobilní fáze A – 5 mM methylamonná s 0,1 % kys. mravenčí, B – acetonitril s 0,1 % kys. mravenčí, gradientní eluce, průtok 0,5 mL/min, objem injekce 5 μL.
• Detekce: MRM přechody pro každou látku, režim pozitivního ionizování, dynamické MRM až 4 000 sledování/s.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity UHPLC systém
• Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS s Agilent JetStream ESI
• Software: MassHunter Acquisition, Quantitative Analysis a Qualitative Analysis

Hlavní výsledky a diskuse

• Linearita: Koeficienty korelace R2 ≥ 0,995 pro všechny analyty.
• Citlivost: Detekční limity v řádu jednotek ppb.
• Recoverie: Průměrné výtěžnosti extrakcí > 98 % ve spikovaných úrovních 10, 15 a 25 ppb.
• Matrické efekty: Kompenzovány použitím matricky navázané kalibrace.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a efektivní úprava vzorků metodou QuEChERS vhodná pro rutinní analýzu.
• Vysoká selektivita a citlivost triple kvadrupólu umožňuje spolehlivé kvantifikace v nízkých koncentracích.
• Flexibilní softwarová podpora pro automatizaci analýzy a integraci do LIMS.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další rozšíření metody na jiné druhy mořských plodů a potravinové matrice.
• Implementace plně automatizovaných pracovních postupů v režimu vysokého průtoku.
• Integrace HRMS technologií pro nespornou identifikaci nedeklarovaných zbytků léčiv.
• Vývoj miniaturizovaných a on-site přenosných LC/MS systémů pro field testing.

Závěr

Navržená metoda kombinuje jednoduchou úpravu vzorku, vysoce výkonnou chromatografii a selektivní detekci na triple kvadrupólu. Dosahuje vynikajících parametrů linearity, citlivosti a recoverie pro stanovení sulfonamidů a chinolonů v krevetech a splňuje požadavky regulačních MRL.