Ultrafast Forensic Screen for Amphetamines in Urine Using the Agilent RapidFire High-Throughput Mass Spectrometry System

Význam tématu

Screening amphetaminů v moči je klíčový prvek forenzní toxikologie, která vyžaduje rychlost, vysokou průchodnost a specifitu při odhalování zakázaných látek. Tradiční imunotesty sice nabízí vysokou propustnost, avšak vykazují riziko křížové reaktivity s běžnými léčivy. Chromatografické techniky (GC/MS, LC/MS) nabízejí přesnost, ale nedosahují požadovaného tempu zpracování vzorků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout ultrarychlý postup pro forenzní screening pěti amphetaminů (amphetamine, methamphetamine, MDA, MDMA, MDEA) v moči s využitím systému Agilent RapidFire High-Throughput MS. Studie demonstruje, že je možné dosáhnout analýzy více než 240 vzorků za hodinu při zachování analytické výkonnosti.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek: lidská moč obohacená o analyt a izotopové interní standardy, 1:50 ředění vodou.

Instrumentace:

• Agilent RapidFire 360 (SPE C18 kazeta)
• Agilent 6460 Triple Quadrupole MS
• MassHunter Qualitative a Quantitative Analysis (verze B.05.00)

Podmínky SPE/MS/MS: cyklus 14,5 s, pufry s formic acid a trifluoroctanem, MRM přechody optimalizované pro každou látku.

Hlavní výsledky a diskuse

Lineární rozsah metody 25–5 000 ng/mL (R2 > 0,998). LOQ 50 ng/mL (CV < 15 %), LOD 25 ng/mL. Intraday i interday přesnost v rámci ±15 % a opakovatelnost (CV) do 10 %. Žádný významný vliv interferentů (ephedrin, pseudoephedrin, phentermine, phenylpropanolamin při 100 000 ng/mL). Stabilita signálu byla prokázána na 2 000 sekvenčních injekcích (CV 2–7 %).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda kombinuje vysokou průchodnost, citlivost a selektivitu bez kompromisů rychlosti. Umožňuje forenzním laboratořím zkrátit doby odezvy, minimalizovat falešně pozitivní výsledky a zefektivnit rutinní screening.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření metodiky na další třídy drog, automatizace přípravy vzorků, integrace do klinické toxikologie, dopingové kontroly či environmentální monitoringu. Potenciál pro miniaturizaci a kombinaci s dalšími vysoko-propustnými systémy.

Závěr

Agilent RapidFire/MS/MS představuje spolehlivou ultrarychlou forenzní metodiku pro screening pěti amphetaminů v moči. Výsledky ukazují vysokou přesnost, selektivitu i robustnost při průchodnosti přes 240 vzorků za hodinu.

Reference

1. Stout PR, Klette KL, Horn CK. Evaluation of ephedrine and pseudoephedrine concentrations in human urine and comparison of amphetamines screening immunoassays. J Forensic Sci. 2004;49:160–164.
2. Manual for Urine Laboratories, National Laboratory Certification Program, SAMHSA, US Dept. of Health and Human Services, October 2010.
3. Moorman P, Hughes J. Amphetamines (Expanded) in Urine by LC/MS/MS, Agilent Technologies, publ. no. 5990-5865EN.