SAMHSA: Confirmation by Triple Quadrupole LC/MS/MS for HHS-compliant Workplace Urine Drug Testing

Význam tématu

Pracovní testování na drogy ve federálně regulovaných programech vyžaduje spolehlivé potvrzení pozitivních screeningových výsledků. Tradiční standard GC/MS je nyní doplněn o techniky LC/MS/MS, které nabízejí rychlejší analýzu, vyšší citlivost a specifitu bez nutnosti derivatizace.

Cíle a přehled studie

Cílem je představit ucelené řešení pro potvrzovací analýzu pěti hlavních tříd drog ve vzorcích moči podle směrnic HHS platných od října 2010. Studie popisuje vývoj, validaci a nasazení LC/MS/MS metod založených na triplekvadropolové technice a porovnává je s tradičními GC/MS postupy.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci látek z moči se využívají osvědčené gravitační SPE kolonky. Chromatografická separace probíhá na sloupci Zorbax SB-C18 (3,0×50 mm, 1,8 µm) v systému Agilent 1200 UPLC. Detekce se provádí na Agilent 6410 Triple Quadrupole LC/MS/MS s ESI zdrojem. Použity jsou pouze dvě mobilní fáze: methanol/20 mM ammonium formiát pro karboxy-THC v negativním ionizačním režimu a methanol/voda s 0,1 % kyselinou formiovou pro ostatní metody.

Hlavní výsledky a diskuse

Metody splňují požadavky HHS na linearitu, přesnost, preciznost, limity a bezproblémový přepočet iontových poměrů. Pro každou třídu drogy jsou dosaženy koeficienty zpětné lineárnosti (r2 ≥ 0,997), přesnost v rozsahu 95–105 % cílové koncentrace a relativní odchylky pod 5 %. Ionové potlačení a procesní účinnost byly vyhodnoceny metodikou Matuszewskiho, ukazují minimální potlačení pro amfetaminy, benzoylecgonin a karboxy-THC a přijatelné potlačení pro 6-acetylmorfin.
Společnost South Bend Medical Foundation potvrdila přechod z GC/MS na LC/MS/MS v NLCP laboratoři, zkrátila injekční cyklus ze 12–14 min na 7–8 min a rozšířila panel o neřízené opioidy.

Přínosy a praktické využití metody

• Žádná derivatizace → nižší náklady na činidla a čas přípravy
• Krátké analytické časy → zvýšení throughput a rychlejší výsledky
• Vysoce citlivá a selektivní detekce MS/MS → spolehlivé potvrzení
• Kompatibilita s existujícími SPE postupy → snadný přechod z GC/MS
• Jednotný hardware, kolony a mobilní fáze pro všechny třídy drog

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření panelu analyzovaných látek díky snadné nastavitelnosti MRM metod. Moderní QQQ systémy s vyšším tlakem a výkonem zdroje umožní ještě kratší cykly a nižší detekční limity. Automatizace přípravy vzorků a integrace s LIMS přispějí k dalšímu zrychlení a zvýšení produktivity laboratoří.

Závěr

Agilent LC/MS/MS řešení poskytuje robustní a validované metody pro potvrzení pozitivních screeningů v moči podle směrnic HHS. Metody překonávají požadavky na přesnost, linearitu, selektivitu a rychlost, což usnadňuje jejich zavedení v akreditovaných toxikologických laboratořích.

Použitá instrumentace

• Agilent 1200 Infinity UPLC
• Zorbax SB-C18 kolona 3,0×50 mm, 1,8 µm
• Agilent 6410 Triple Quadrupole LC/MS/MS s ESI
• Gravitační SPE kolonky (Biochemical Diagnostics)
• Deuterované interní standardy (Cerilliant)

Reference

• Stout P.R., Bynum N.D., Mitchell J.M., Baylor M.R., Ropero-Miller J.D. A Comparison of the Validity of Gas Chromatography–Mass Spectrometry and Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Analysis of Urine Samples for Morphine, Codeine, 6-Acetylmorphine, and Benzoylecgonine. Journal of Analytical Toxicology 33:398–408, 2009.
• Stout P.R., Bynum N.D., Mitchell J.M., Baylor M.R., Ropero-Miller J.D. A Comparison of the Validity of Gas Chromatography–Mass Spectrometry and Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Analysis of Urine Samples II: Amphetamine, Methamphetamine, MDA, MDMA, MDEA, PCP and cTHC. Journal of Analytical Toxicology 34:430–433, 2010.
• NATIONAL LABORATORY CERTIFICATION PROGRAM. Manual for Urine Laboratories. RTI International, Center for Forensic Sciences, 2010.