Ultrafast Analysis of Barbiturates in Urine by the Agilent RapidFire High-Throughput Triple Quadrupole Mass Spectrometry System

Význam tématu

Barbituráty představují skupinu psychofarmak s vysokým rizikem zneužití a závislosti. Rychlá a spolehlivá detekce těchto látek v moči je nezbytná pro forenzní toxikologii, kde se vyžaduje vysoká vzorkovací kapacita a krátké doby analýz. Systém Agilent RapidFire/MS/MS poskytuje oproti konvenčním LC/MS/MS výrazně zkrácené doby analýzy při zachování vysoké přesnosti a citlivosti.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo vyvinout ultrarychlou metodu pro simultánní kvalitativní stanovení pěti běžných barbiturátů (butalbital, phenobarbital, secobarbital, amobarbital a pentobarbital) v lidské moči. Kombinací jednoduché přípravy vzorků metodou diluce a přímého zavedení s ultrarychlým SPE modulem RapidFire a trojitou kvadrupólovou hmotnostní spektrometrií byla sestavena vysoce efektivní analytická cesta.

Použitá instrumentace

• Agilent RapidFire 360 (ultrafast SPE systém)
• Agilent 6460 Triple Quadrupole Mass Spectrometer
• Software MassHunter Triple Quadrupole Acquisition a MassHunter Quantitative Analysis

Použitá metodika

Vzorky moči se připravily ředěním v poměru 1:50 s přidáním izotopově značeného interního standardu butalbital-d5. Analýza proběhla bez chromatografie přímo na reversed-phase fenylové SPE kazetě. Interval od vstřiku k vstřiku činil 16 sekund. Pro kvantifikaci byl použit režim MRM v negativní ESI.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala lineární rozsah 50–10 000 ng/mL s regresními koeficienty R2 > 0,995. Intraday a interday přesnost (RSD) a správnost (accuracy) byly v celém rozsahu < 10 %. Nebyl pozorován významný carry-over ani matriový efekt (< 10 %). Díky rychlosti až 225 vzorků za hodinu nabízí metoda více než 15násobné zrychlení oproti tradičním LC/MS/MS protokolům.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení doby analýzy při udržení vysoké analytické kvality
• Jednoduchá příprava vzorků bez složité chromatografie
• Vhodné pro forenzní screening a kvalitativní stanovení velkého množství vzorků

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit o další skupiny drog úpravou SPE kazety a MRM přechodů. Další směřování zahrnuje plnou automatizaci workflow, integraci pokročilých algoritmů zpracování dat a rozšíření na kvantitativní analýzy s vyšším stupněm multiplexace.

Závěr

Ultrarychlá SPE/MS/MS metoda nabízí vysokou propustnost, robustnost a dostatečnou citlivost pro kvalitativní analýzu barbiturátů v moči. Díky jednoduché přípravě a krátkým dobám cyklu představuje efektivní alternativu ke konvenčním HPLC a LC/MS/MS přístupům v forenzní toxikologii.

Reference

• June Feng, Lanqing Wang, Ingrid Dai, Tia Harmon, John T. Bernert. Simultaneous Determination of Multiple Drugs of Abuse and Relevant Metabolites in Urine by LC/MS/MS. Journal of Analytical Toxicology, 31, 2007, 359–368.