Transfer of the HPLC Method for Related Substances Analysis of Metoclopramide HCl from an Agilent 1260 Infinity LC System to an ACQUITY Arc System

Význam tématu

Pro kontrolu kvality a bezpečnosti léčiv je klíčové kvantifikovat účinnou látku a její příbuzné nečistoty. Přesná a reprodukovatelná chromatografická metoda zajišťuje shodu s regulačními požadavky, minimalizuje riziko nesprávných výsledků a šetří čas i náklady spojené s opakovanou validací.

Cíle a přehled studie

Cílem práce bylo provést přenos HPLC metody pro stanovení příbuzných látek metoklopramidu HCl z jednoho typu chromatografu (Agilent 1260 Infinity) na novější platformu (ACQUITY Arc) a ověřit, že výsledky jsou srovnatelné z hlediska separace a systémové způsobilosti podle USP <621>.

Použitá metodika

Příprava vzorků:

• Stock roztoky API a nečistot (1,0 mg/ml) v metanolu.
• Ředění API na 0,5 mg/ml ve vodě a přídavek nečistot na 1 % pro testy separace.
• Připrava roztoku pro systémovou způsobilost: 0,05 mg/ml, 15 µg/ml směsi nečistot v 50:50 metanol/voda.

Chromatografické podmínky:

• Kolona: XSelect CSH C18 4,6×150 mm, 5 µm, teplota 45 °C.
• Mobilní fáze A: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě; B: 0,1 % kyselina mravenčí v metanolu.
• Gradient: lineární program od A/B = X do Y (přenos přesný z původní metody).
• Průtok 2,9 ml/min, injekční objem 10 µl.
• Detekce UV 210–400 nm, derivace při 270 nm, vzorkovací frekvence 20 bodů/s.
• System suitability: 5x injekce roztoku nečistot, sledováno RSD retencí a plošných integrálů.

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity LC System: křemíková čtyřkanálová pumpa, DAD detektor, tepelná postkolonní výměna nízké disperse.
• ACQUITY Arc System: quaternární pumpa s Multi-flow path™ technologií, 2998 PDA detektor, ACQUITY QDa (ESI +/–, m/z 100–440), pasivní předehřívač, dráha Flow Path 1.
• Software Empower 3 pro sběr UV a MS dat.

Hlavní výsledky a diskuse

• Chromatogramy z obou systémů vykázaly identickou selektivitu a separační výkon bez ztráty rozlišení jednotlivých nečistot.
• System suitability požadavky USP <621> (RSD < 2 % pro retence i plochu, hodnoty rozlišení a tvaru píku) byly naplněny na obou přístrojích, přičemž ACQUITY Arc dosáhla obdobných nebo lepších RSD.
• Mass detection na QDa potvrdila identitu API i příbuzných látek rychle a spolehlivě.

Přínosy a praktické využití metody

• Umožňuje konsistentní výsledky napříč různými LC platformami bez nutnosti nákladné revalidace.
• Zvyšuje efektivitu laboratoří QC díky rychlému přenosu metod a integraci s hromadnými systémy pro sběr dat.
• Podporuje dodržení dobré laboratorní praxe (GLP) a regulačních standardů.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další rozvoj Multi-flow path™ technologií pro okamžité přepínání mezi více metodami.
• Integrace hmotnostní detekce s vyšším rozlišením pro komplexní metabolitové studie.
• Automatizace přípravy vzorků a online kvantifikace v reálném čase.
• Cloudové CDS platformy pro centralizovanou správu dat a pokročilou analýzu.

Závěr

Metoda pro stanovení příbuzných látek metoklopramidu HCl byla úspěšně přenesena z Agilent 1260 Infinity na ACQUITY Arc System bez kompromisů v kvalitě separace. Nová platforma přináší lepší variabilitu, rychlejší potvrzení identity a širší možnosti integrace s moderními detektory a softwarem.

Reference

1. USP General Chapter <621> Chromatography, USP 37-NF 32, The United States Pharmacopeia Convention, Official December 1, 2014.