Fingerprint Profiling of Extracts from Danshen (Salvia miltiorrhiza) Using Sub-2 μm Superficially Porous LC Columns

Fingerprint Profiling extraktů z Danshen (Salvia miltiorrhiza) pomocí sub-2 µm superficially porous LC kolon

Význam tématu

Chromatografická fingerprint analýza je klíčová pro hodnocení kvality a autenticity tradičních čínských léčiv (TCM), kde komplexní matrice obsahuje desítky až stovky látek. Vysoce výkonné separační techniky s velkou kapacitou slouží k identifikaci charakteristických vzorců, které zajišťují spolehlivou kontrolu kvality extraktů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem application note je převést regulované HPLC metody pro fingerprint profilování celkových fenolických kyselin a tanshinonů dle Čínské farmakopeje (CHP) na moderní UHPLC systém s sub-2 µm superficially porous kolonami Agilent InfinityLab Poroshell 120. Studie porovnává efekty kratších (100 mm) a delších (150 mm) kolon na kapacitu a rozlišení.

Použitá metodika a instrumentace

Pro analýzu byl použit Agilent 1290 Infinity LC systém sestávající z:

• Agilent 1290 Infinity Binary Pump
• Agilent 1290 Infinity Autosampler
• Agilent 1290 Infinity Thermostatted Column Compartment
• Agilent 1290 Infinity Diode Array Detector

Jako kolony byly zvoleny Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (1,9 µm) o rozměrech 2,1×100 mm a 2,1×150 mm. Použité mobilní fáze:

• Voda s 0,026–0,05 % kyseliny fosforečné
• Acetonitril

Gradientní eluce, teplota kolony 25–30 °C, průtok 0,33–0,42 mL/min, detekce UV při 270–286 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Implementace sub-2 µm superficially porous kolon přinesla výrazné zvýšení špičkové kapacity (nc ~126–131 pro 150 mm kolonu oproti ~91–98 pro 100 mm). Delší kolona umožnila lepší rozlišení klíčových fenolických kyselin (např. kyselina rozmarínová, lithospermická kyselina B) a tanshinonů (cryptotanshinon, tanshinon IIA). Snížení doby analýzy o 50–60 % při zachování vysokého rozlišení usnadňuje vysokoprůtokové varianty analýz.

Přínosy a praktické využití metody

Výsledná metoda poskytuje:

• Výrazně více informačních signálů pro komplexní vzorky
• Rychlejší analýzu pro QC laboratoře
• Vysokou reprodukovatelnost a citlivost
• Možnost standardizace fingerprint databází pro TCM

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj mohou přinést:

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro strukturální identifikaci
• Automatizované vyhodnocovací algoritmy a strojové učení
• Rozšíření fingerprint profilek na další rostlinné extrakty
• Miniaturizace a přenositelnost metod mezi laboratořemi

Závěr

Agilent InfinityLab Poroshell 120 kolony s partikulí 1,9 µm poskytují vysokou separační kapacitu i zkrácenou dobu analýzy pro fingerprint profilování Danshen. Delší kolony posilují rozlišení a informativnost chromatogramu, což zvyšuje efektivitu kontroly kvality tradičních čínských léčiv.

Reference

1. Tsai-Hui Lin, Ching-Liang Hsieh, Lin Hsieh. Chinese Medicine 5:22 (2010).
2. Salvia Total Phenolic Acids and Tanshinones. China Pharmacopoeia 397 (2015).