Macrolide Analysis in Pork Using Bond Elut QuEChERS dSPE EMR—Lipid and Poroshell 120

Význam tématu

Antibiotické rezidua ve vepřovém mase představují riziko pro spotřebitele i pro dodržování legislativních limitů. Makrolidy, jako spiramycin, tilmikosin nebo erythromycin, jsou široce využívaná antibiotika, jejichž stopová množství je nutné spolehlivě detekovat a kvantifikovat. Metoda založená na QuEChERS přináší rychlou a efektivní přípravu vzorku s minimální spotřebou rozpouštědel a časovou úsporou.

Cíle a přehled studie

Cílem práce bylo vyvinout a validovat multireziduální analytický postup pro sedm makrolidů v homogenizovaném mase prasat. Klíčovým krokem byla aplikace sorbentů EMR–Lipid pro selektivní odstranění lipidů a optimalizace separačních podmínek na kolonu Poroshell 120 EC-C18. Kvantifikace probíhala v režimu MRM na LC–MS/MS.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorek: 2,5 g homogenizovaného vepřového masa.
• Extrahce: 10 mL acetonitrilu, 8 mL vody, QuEChERS sůl (NaCl/MgSO4).
• Čištění: dvojnásobný krok s Agilent Bond Elut QuEChERS dSPE EMR–Lipid a finální polish s NaCl/MgSO4.
• Rozpuštění/Třídění: 200 µL ACN extractu do 800 µL vody.
• Instrumentace:
  • Agilent 1290 Infinity LC
  • Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS/MS s ESI+ v MRM
  • Kolona Poroshell 120 EC-C18 (3,0×100 mm, 2,7 µm)
• Mobilní fáze: A = 10 mM NH4OAc + 0,1 % FA ve vodě, B = acetonitril; gradient 20–65 % B; tok 0,5 mL/min; T = 30 °C.
• MS zdroj: teplota 300–400 °C, gas flow 5–11 L/min, nebulizér 45 psi, kapilára 4000 V.

Hlavní výsledky a diskuse

• Detekční limity pod 0,1 µg/kg pro všechny analyty (S/N ≥ 3), vyhovující regulacím.
• Lineární rozsah 5–250 µg/kg s koeficienty R² > 0,9996.
• Průměrné zotavení 63,9–98,4 % s RSD 3,8–10,3 %.
• Rychlá chromatografická separace sedmi makrolidů s rozlišením 2,2–4,5 minuty.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje jednoduchou přípravu vzorku s účinným odstraněním interferujících lipidů, zachovává vysokou návratnost analytů a prodlužuje životnost chromatografické kolony. Je ideální pro rutinní kontrolu antibiotických reziduí v potravinářských laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Adaptace postupu na další tukové matrice (mléko, maso, ryby).
• Automatizace QuEChERS pro vysokou propustnost analýz.
• Vývoj nových selektivnějších sorbentů a kombinace s HRMS pro screening neznámých reziduí.
• Implementace datové analýzy s umělou inteligencí pro rychlou interpretaci výsledků.

Závěr

Navržená metoda QuEChERS dSPE EMR–Lipid v kombinaci s LC–MS/MS je rychlá, citlivá a reprodukovatelná. Umožňuje spolehlivé stanovení makrolidových antibiotik ve vepřovém mase s nízkými detekčními limity a vysokou přesností, vhodné pro rutinní potravinářské kontroly.

Reference

1. Anonym. GB/T 23408-2009 Determination of macrolides residues in honey – LC-MS/MS method. China Standard, 2009.
2. Anonym. SN/T 1777.2-2007 Determination of macrolide antibiotic residues in animal-derived food – part 2: LC-MS/MS method. China Standard, 2007.
3. Zhai CH, Fu RJ. Macrolides in Honey Using Agilent Bond Elut Plexa SPE, Poroshell 120, and LC/MS/MS. Agilent Technologies, Application Note 5991-3190EN, 2013.