EuroResidue: THE ANALYSES OF MACROLIDES, TETRACYCLINE AND SULFONAMIDE ANTIBIOTICS IN ANIMAL TISSUES USING LC-MS/MS

Význam tématu

Veterinární antibiotika se používají při léčbě, prevenci onemocnění a někdy i pro podporu růstu hospodářských zvířat. Nedodržení předepsaných odstávkových lhůt však může vést k nepřípustným reziduím antibiotik v mase, vejcích či rybách, což ohrožuje bezpečnost potravin i zdraví spotřebitelů. Regulace prostřednictvím stanovení maximálních reziduálních limitů (MRL) a následné monitorovací programy jsou proto klíčové pro zajištění souladu s předpisy a podporu mezinárodního obchodu.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem prezentované práce bylo vyvinout a validovat dvě oddělené analytické metody pro současné stanovení reziduí skupiny makrolidových antibiotik v hovězí tkáni a kombinace tetracyklinů se sulfonamidy v krevetách. Analýzy byly provedeny na ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografii (UPLC) spojené s tandemovou hmotnostní spektrometrií (MS/MS). Validace metod odpovídala požadavkům směrnice Komise 2002/657/ES.

Použitá metodika a instrumentace

Pro obě metody byl využit chromatografický systém ACQUITY UPLC I-Class s FTN Sample Manager a detektor Xevo TQ-S micro (ES+). Klíčové parametry jsou shrnuty:

• Kolony: ACQUITY HSS T3 1,8 µm 2,1×100 mm pro makrolidy a ACQUITY HSS C18 1,8 µm 2,1×100 mm pro tetracykliny/sulfonamidy
• Mobilní fáze makrolidů: voda + 0,1 % kyseliny mravenčí (A) a acetonitril + 0,1 % kyseliny mravenčí (B)
• Mobilní fáze tetracyklinů/sulfonamidů: voda + 0,1 % kyseliny mravenčí (A) a methanol + 0,1 % kyseliny mravenčí (B)
• Příprava vzorků: homogenizace tkáně/krevet, extrakce, čištění a příprava matrix-matched kalibrací
• Validace: dodržení kritérií správnosti, přesnosti, selektivity i mezí detekce a kvantifikace dle 2002/657/ES

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda pro makrolidy v hovězí tkáni prokázala vysokou citlivost a selektivitu, s limity stanovení odpovídajícími nebo nižšími než MRL pro všechny analyty. Regresní závislosti ukázaly výborné linearity v rozsahu stanoveném legislativou, přesnost a opakovatelnost byly v mezích ±20 %. Časy analýzy se pohybovaly do 8 minut, což dovoluje vysokou průchodnost vzorků.
Metoda pro tetracykliny a sulfonamidy v krevetách rovněž prokázala adekvátní limity kvantifikace, korelace blízké 1 a stabilní výtěžnost extrakce. Získané koncentrace standardů ukázaly dobrou shodu s povolenými limity, recyklace metody a opakovatelnost byly rovněž v legislativních mezích.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a citlivá detekce reziduí makrolidů, tetracyklinů a sulfonamidů
• Splnění požadavků na kontrolu souladu s MRL
• Možnost rozšíření aplikace na další typy tkání či vodní organismy
• Nákladová efektivita a snadná implementace v rutinních laboratořích
• Potenciál pro rámcové screeningové testy při nižších koncentracích

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj vysokopropustných automatizovaných analytických platforem pro široké spektrum veterinárních léčiv. Integrace s vysokorychlostními screeningovými metodami, rozšíření panelu analyzovaných látek včetně metabolitů a využití pokročilých datových nástrojů pro zpracování výsledků zvýší účinnost monitoringu. Hybridní techniky spojené s vysokorozlišovacími spektrometry mohou dále zlepšit selektivitu a citlivost analýzy.

Závěr

Popsané postupy pro stanovení makrolidů v hovězí tkáni a tetracyklinů se sulfonamidy v krevetách byly úspěšně validovány dle evropské legislativy. Metody poskytují rychlé, spolehlivé a citlivé stanovení reziduí, jsou nákladově efektivní a připravené pro rutinní aplikaci v souladu s požadavky na bezpečnost potravin.

Reference

• Hird S, Robert C, Demoulin L, Pierret G, Gillard N, Van Hulle M. The analyses of macrolides, tetracycline and sulfonamide antibiotics in animal tissues using LC-MS/MS. Waters Corporation; 2022.