Nitrosamines Analysis in Pharmaceuticals - Consumables workflow ordering guide

Význam tématu

Mutagenní nitrosaminy v léčivých látkách a finálních formách léků představují významné riziko pro zdraví, neboť i nízké koncentrace mohou poškozovat DNA a zvyšovat riziko vzniku nádorů. Regulátoři (FDA, EDQM, HSA aj.) proto vyžadují velmi citlivé a specifické analytické metody pro jejich detekci a kvantifikaci.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem materiálu je představit pracovní postup pro stanovení osmi klíčových nitrosaminů (NDMA, NDEA, NDIPA, NEIPA, NDBA, NMBA aj.) v API a hotových lécích (sartany, metformin, ranitidin) pomocí metod LC/MS/MS s triple kvadrupólem a LC/Q-TOF. Dokument shrnuje volbu kolony, nastavení UHPLC a optimální parametry detekce.

Použitá metodika a instrumentace

Ultrarychlá kapalinová chromatografie v kombinaci s hmotnostní spektrometrií:

• Systémy Agilent 1290 Infinity II UHPLC (pumpa, autosampler, termostat kolony).
• Detektory: 6470B Triple Quadrupole LC/MS, 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS, Ultivo Triple Quadrupole LC/MS.
• Kolony: InfinityLab Poroshell HPH-C18 (4.6×150 mm, 2,7 µm) a Poroshell 120 PFP (3.0×150 mm, 2,7 µm) pro oddělení pozičních isomerů NDIPA/NDPA.
• Mobilní fáze: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě a v methanolu; gradientní eluce s lineárním přechodem mezi 5–90 % methanolu.
• Příprava vzorku: ředění vodou/methanolem, filtrace PVDF/PES peletovými filtry.

Hlavní výsledky a diskuse

Metody dosahují detekční meze až 0,5 ng/mL při vysoké specifičnosti MRM přechodů. PFP fáze umožňuje baseline separaci pozičních izomerů NDIPA a NDPA. Optimalizace MS/MS podmínek zvyšuje citlivost a přesnost kvantifikace. Reprodukovatelnost retenčních časů a ploch špiček potvrzena v opakovaných analýzách.

Přínosy a praktické využití metody

Metodika splňuje požadavky mezinárodních předpisů pro rutinní kontrolu kvality API i hotových forem léků. Umožňuje rychlé, citlivé a selektivní stanovení širokého spektra nitrosaminů. Díky robustním kolonám a standardizovaným workflow lze zkrátit dobu vývoje metod a snížit provozní náklady.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj se zaměří na vysokorozlišovací MS techniky pro potvrzování struktury neznámých impurit, automatizaci sběru dat a pokročilé kolony s novými selektivními fázemi. Vznikají aplikace pro on-line monitoring procesních toků a miniaturní přístroje pro v terénu.

Závěr

Popisované LC/MS/MS a LC/Q-TOF metody představují spolehlivé a vysoce výkonné nástroje pro detekci nitrosaminů v léčivech. Doporučené kolony Poroshell HPH-C18 a PFP, spolu s optimalizovanými přechody MRM, umožňují splnit přísné regulační limity s vynikající přesností.

Reference

1. Agilent Technologies. Nitrosamines analysis in pharmaceuticals using single quadrupole GC/MS and triple quadrupole GC/MS/MS: Consumables workflow ordering guide. 5994-2979EN.
2. Agilent Technologies. Nitrosamine Impurities Application Guide – Confidently detect and quantify mutagenic impurities in APIs and Drug Products. 5994-2393EN.
3. Agilent Technologies. Determination of a Genotoxic NDMA Impurity Using the High-Resolution Agilent 6546 LC/Q-TOF in Ranitidine Drug Substance and Drug Products. 5994-1626EN.
4. Agilent Technologies. Simultaneous Determination of Eight Nitrosamine Impurities in Metformin Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS. 5994-2286EN.
5. Agilent Technologies. Determination of Nitrosamine Impurities Using the Ultivo Triple Quadrupole LC/MS. 5994-1383EN.
6. Agilent Technologies. Determination of NDMA Impurity in Ranitidine Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS. 5994-1668EN.
7. Agilent Technologies. Determination of Nitrosamine Impurities Using the High-Resolution Agilent 6546 LC/Q-TOF. 5994-1372EN.
8. Agilent Technologies. Simultaneous Determination of Eight Nitrosamine Impurities in Metformin Extended-Release Tablets Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS. 5994-2533EN.