Highly Analytically-sensitive Analysis of Aldosterone in Plasma on the Xevo TQ-XS for Clinical Research

Význam tématu

Aldosteron je mineralkortikoidní steroidový hormon s klíčovou rolí v regulaci sodíku, draslíku a krevního tlaku. V klinickém výzkumu je monitoring jeho koncentrace důležitý zejména při hodnocení inhibitorů aldosteron syntázy a v diagnostice poruch renin-angiotenzin-aldosteronového systému. Kvůli nízkým hladinám v plasmatických vzorcích (<25 pg/mL) vyžaduje analýza vysoce citlivé a reprodukovatelné metody.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo porovnat analytickou citlivost a přesnost metody LC-MS/MS pro stanovení aldosteronu v plasmě mezi hmotnostními spektrometry Waters Xevo TQ-XS a Xevo TQ-S. Provedla se měření nízkých koncentračních roztoků i extraktů z plazmy, včetně opakovaných analýz na různých dnech.

Použitá metodika a příprava vzorků

Aldosteron byl extrahován z plasmatu precipitací roztokem síranu zinečnatého v methanolu, následovalo ředění kyselinou fosforečnou a aplikace na Oasis MAX µElution desorpční kelímky. Vzorky prošly sekvenčním mytím (kyselina fosforečná, amoniak v 10 % methanolu, voda) a eluovány 70 % vodným methanolem. Následovala diluce vodou a injekce na ACQUITY UPLC I-Class na CORTECS C18 kolonu s gradientem vody a methanolu. Monitorovány byly MRM přechody 359,2 → 189,0 (kvantifikátor) a 359,2 → 297,2 (kvalifikátor) pro analyzát; interním standardem byl aldosteron-4H2 s přechodem 363,2 → 190,0.

Použitá instrumentace

• LC systém: Waters ACQUITY UPLC I-Class
• Kolona: Waters CORTECS C18
• Spektrometry: Waters Xevo TQ-XS a Xevo TQ-S s ESI zdrojem
• Iontová optika: StepWave™ XS (u TQ-XS)
• Detektor: Xtended Dynamic Range (XDR) (u TQ-XS)

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnáním 1 pg/mL roztoku aldosteronu se na Xevo TQ-XS dosáhlo signifikantně vyššího signál-šum poměru (RMS = 54 vs. 9 na TQ-S) a nižší RSD (< 2 %, n = 3). Nízký kalibrátor v odvirované plasmě (15 pg/mL) a extrakt plasmy (11,6 pg/mL) vykazovaly lepší reprodukovatelnost na TQ-XS napříč třemi dny. Celková impreciznost metody (QC body 21–669 pg/mL) se u TQ-XS snížila na 3,9–7,9 %, zatímco TQ-S dosahoval 5,0–8,3 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Detekce aldosteronu v plasmě až na úrovni 1 pg/mL s RSD < 2 %
• Široký lineární rozsah díky XDR detektoru
• Vyšší signál-šum poměr a lepší reprodukovatelnost
• Možnost přímého přenosu metod z předchozích generací přístrojů

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda s vysokou citlivostí umožní aplikaci v farmakokinetických a farmakodynamických studiích nízkodávkových inhibitorů aldosteron syntázy. Další vývoj může zahrnovat automatizaci přípravy vzorků a multikriteriální screening hormonů v malých objemech biologických kapalin.

Závěr

Xevo TQ-XS významně rozšiřuje možnosti citlivé analýzy aldosteronu v plasmě, poskytuje lepší signál-šum, nižší impreciznost a širší dynamický rozsah, což přispívá k přesnější a spolehlivější podpoře klinického výzkumu.

Reference

• Foley D. Highly Analytically-sensitive Analysis of Aldosterone in Plasma on the Xevo TQ-XS for Clinical Research, Waters Corporation, 2016.