INNOVATOR AND BIOSIMILAR INFLIXIMAB: COMPARABILITY ASSESSMENT OF THE HOST CELL PROTEINS AND PROTEIN HIGHER ORDER STRUCTURE

Význam tématu

Porovnání originální monoklonální protilátky infliximab a jejího biosimiláru Inflectra z hlediska hostitelských proteinů (HCP) a vyšší řádové struktury (HOS) je klíčové pro ověření kvality a bezpečnosti biosimilárních léčiv. Taková analýza podporuje regulatorní schvalování a zajišťuje konzistenci biologických produktů v praxi.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo srovnat hladiny a identitu HCP a prověřit terciární strukturu obou protilátek pomocí pokročilých LC–MS a HDX MS technik.

• Porovnání HCP profilů infliximabu a Inflectry pomocí 2D-LC/HDMSE.
• HOS analýza prostřednictvím výměny vodíku s deuteriem (HDX MS).

Použitá metodika a instrumentace

Pro HCP analýzu byla využita dvoudimenzionální vysokotlaká kapalinová chromatografie (RP/RP 2D-LC) v kombinaci s datově nezávislou akumulací fragmentačních dat na přístroji Synapt G2-S HDMS. Vzorky byly připraveny z inovátoru (21 mg/mL) a biosimiláru (10 mg/mL) s následnou on-line trapaží a separací na kolonkách C18 při pH 10 a pH 2,4. Pro strukturu HOS byla aplikována HDX MS metoda s automatizovaným značením v HDX-2 systému, on-line trávením na Enzymate kolonce a separací na BEH C18 sloupci. K identifikaci a kvantifikaci dat byl použit software PLGS 3.0.2 a DynamX 3.0.

Hlavní výsledky a diskuse

• V obou mAb byly identifikovány dva HCP: epidermální růstový faktor podobný protein 8 a WD repeat obsahující protein 37.
• Biosimilární vzorek vykazoval 2–4násobně vyšší celkové množství HCP ve srovnání s inovátorem.
• HDX MS analýza potvrdila značnou podobnost terciární struktury obou protilátek, s drobným odchylkovým rozdílem v oblasti CH2 domény.

Přínosy a praktické využití metody

• Detailní charakterizace HCP a HOS pomáhá ověřit kvalitativní shodu biosimilárních produktů.
• Metody poskytují robustní platformu pro QA/QC v biotechnologické výrobě.
• Výsledky podporují regulatorní procesy a přispívají ke zrychlení uvedení biosimilárních léčiv na trh.

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace umělé inteligence a pokročilé bioinformatiky pro rychlejší analýzu dat, rozšíření aplikace na další biologické terapie, multidisciplinární přístupy spojující spektrometrii s molekulovým modelováním a kontinuální monitoring produkce v reálném čase představují perspektivní směřování.

Závěr

Studie prokázala, že i přes zvýšený obsah HCP u biosimiláru Inflectra zůstává vyšší řádová struktura obou protilátek vysoce srovnatelná. Tento přístup přináší cenné poznatky pro vývoj a schvalování biosimilárních léčiv.