LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceWaters
Význam tématu
Beta-agonisté se používají ke stimulaci růstu u hospodářských zvířat, ale představují riziko pro lidské zdraví a jejich použití je ve většině zemí zakázáno nebo přísně regulováno.
Citlivá a selektivní analýza reziduí beta-agonistů zajišťuje dodržování bezpečnostních limitů, podporuje důvěru spotřebitelů a usnadňuje mezinárodní obchod s masem.
Cíle a přehled studie
- Vyvinout a ověřit cílenou UPLC-MS/MS metodu pro detekci 16 beta-agonistů v mase, orgánech a moči.
- Zajistit limity detekce pod hranicemi MRL, MRPL a dalších doporučených hodnot včetně přísných exportních požadavků (např. Rusko 0,1 µg/kg pro ractopamin).
- Implementovat screening pomocí STC (Screening Target Concentration) a potvrzovací analýzu se stabilními izotopovými vnitřními standardy.
Použitá instrumentace
- ACQUITY UPLC I-Class System s FTN autosamplerem
- Xevo TQ-S micro tandemový kvadrupólový hmotnostní spektrometr
- CORTECS UPLC C18+ kolona (1,6 µm, 2,1 × 100 mm)
- MassLynx MS Software a TargetLynx Application Manager
Metodika
Vzorky masa, jater a ryb se extrahovaly vodno-methanolovým pufrem, podrobily enzymatické hydrolýze a čistily metodou SPE. Moč prošla obdobným režimem extrakce.
Chromatografie probíhala v gradientu 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě a acetonitrilu, doba analýzy 11 minut, průtok 0,6 mL/min, kolona 40 °C.
MS v režimu ESI+ monitoroval dvě MRM přechody pro každý analyt a jeden pro izotopový standard. STC hodnoty se pohybovaly od 0,05 do 5 µg/kg dle matrice a analytu.
Hlavní výsledky a diskuse
- Citlivost a selektivita: detekce všech analýzovaných beta-agonistů bez izobarických interferencí.
- Opakovatelnost: RSD plochy <5 % pro většinu sloučenin, při vnitřní normalizaci <4 %.
- Linearita: r2 >0,99 pro ractopamin (0,25–5 µg/kg) a clenbuterol (0,05–1 µg/kg).
- Proficiency testy: naměřené koncentrace odpovídaly referenčním hodnotám, recovery kolem 100 %.
- Identifikace: iontové poměry a retenční časy splňují toleranční limity dle EU 2002/657/EC.
Přínosy a praktické využití metody
Metoda umožňuje oficiální kontrolu reziduí beta-agonistů i přísné předexportní testování s nízkou kvantifikační mezí. Podporuje dodržování různých mezinárodních limitů a zajišťuje spolehlivou identifikaci a kvantifikaci.
Budoucí trendy a možnosti využití
- Automatizace přípravy vzorků a nasazení vysokoprůtokových systémů
- Rozšíření na nové analyty a multireziduální platformy
- Integrace s HRMS pro screening neznámých sloučenin
- Využití pokročilé datové analýzy a umělé inteligence pro prediktivní monitoring
Závěr
Navržená UPLC-MS/MS metoda s Xevo TQ-S micro a CORTECS kolonu nabízí vysokou citlivost, přesnost a spolehlivost pro stanovení beta-agonistů v matrikách živočišného původu. Laboratoře by měly validovat metodu v souladu s místními požadavky na CCα a CCβ.
Reference
- Centner TJ Alvey JC Stelzleni AM Beta agonists in livestock feed status health concerns and international trade J Animal Sci 2014 92(9) 4234–40
- Nino AMM Granja RH Wanschel AC Salerno AG The challenges of ractopamine use in meat production for export to EU and Russia Food Control 2017 72 289–292
- European Commission Decision 2003/181/EC amending Decision 2002/657/EC Official Journal L71 17–18
- European Commission Decision 2002/657/EC implementing Directive 96/23/EC Official Journal L221 8–36
- Radeck W Gowik P Validation of a multiresidue method for confirmation and quantification of β agonists in liver EURL BVL Germany 2003
- Radeck W Gowik P Validation of a multiresidue method for confirmation and quantification of 22 beta agonists in urine Antwerp 2006
- Radeck W Confirmatory method for 30 β agonists in muscle LC-MS/MS unpublished 2008
- Ren Y Yang J Determination of common beta agonist residues in meat by UPLC MS/MS Waters Application Note 720004388en 2012
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
