Alliance Carryover Performance Part 2: Carryover Improvement Achieved Through Needle Wash Optimization for the 2018 Alliance HPLC System

Význam tématu

V chromatografických laboratořích představuje přetrvávání vzorku v systému (carryover) závažný zdroj falešně pozitivních výsledků a snížené přesnosti měření. Optimalizace mytí jehly a volby mycího roztoku je klíčová pro zajištění reprodukovatelnosti a spolehlivosti HPLC analýz, zejména u vysoce citlivých či farmaceutických aplikací.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyhodnotit vliv rozdílných režimů mytí jehly (normal, double, extended) a různých složení mycího roztoku na úroveň carryover u 2018 Alliance HPLC systému. Jako modelové látky byly použity coumarin a quetiapin fumarát.

Použitá metodika a instrumentace

• HPLC systém: Waters 2018 Alliance e2695 s 100 μL stříkačkou, 2998 PDA detektorem a e2695 Enhancement Kit (Firmware 3.04).
• Kolony: CORTECS C18 (2,7 μm, 3×100 mm) pro coumarin; XBridge BEH C8 (5 μm, 4,6×250 mm) pro quetiapin fumarát.
• Podmínky analýz: teplota kolony 30 °C / 25 °C, teplota vzorku 4 °C, průtok 0,8 / 1,3 mL·min⁻¹, objem injekce 4 μL / 50 μL.
• Needle wash solventy: 90:10 voda:acetonitril; 70:30 methanol:voda. Režimy mytí: normal, double, extended.
• Výpočet carryover: pro coumarin metodou s nasycovacím roztokem (% carryover = plocha blank po výzvě / plocha standardu × 0,01); pro quetiapin přímou kvantifikací (% carryover = plocha blank po výzvě / plocha standardu × 100).

Hlavní výsledky a diskuse

• Režimy mytí jehly: přechod z normal na double snížil carryover coumarinu 1,2× a quetiapinu 1,5×; režim extended přinesl redukci 2,5× (coumarin) a 2,7× (quetiapin) oproti defaultnímu.
• Složení mycího roztoku: u quetiapinu fumarátu zvýšení podílu organické fáze na 70 % methanolu ve water wash minimalizovalo carryover 3× oproti 90:10 voda:ACN.
• Kombinace dlouhého cyklu mytí a vhodného rozpouštědla umožňuje účinné odstranění zbytků analytu z povrchu jehly.

Přínosy a praktické využití metody

Optimalizace režimu a složení jehlového mytí vede k výraznému snížení rizika kontaminace mezi po sobě jdoucími injekcemi. To zvyšuje přesnost a opakovatelnost výsledků, zkracuje dobu validace metod a podporuje vyšší průchodnost vzorků v rutinních i výzkumných laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření optimalizace na další typy sloučenin s odlišnou chemií a lipofilicitou.
• Vývoj automatizovaných protokolů pro dynamickou volbu mycího roztoku dle charakteru vzorku.
• Integrace pokročilých algoritmů a strojového učení pro predikci nejefektivnější hygieny jehly před injekcí.

Závěr

Kombinace rozšířeného režimu mytí jehly a cíleně navrženého mycího roztoku významně snižuje carryover u 2018 Alliance HPLC systému. Implementace těchto změn vede k vyšší spolehlivosti chromatografických analýz, zejména u farmaceutických aplikací.

Reference

• Jenkins, T.; Waite, M. Low Sample Carryover with Key Performance Indicators on the Alliance HPLC System. Waters technology brief 720004534EN.
• United States Pharmacopeia and National Formulary. Quetiapine Fumarate USP 40 NF35 S1. The United Book Press, Inc., 2017, s. 5939.
• Dolan, J. Autosampler Carryover. LCGC Europe, Volume 19, Issue 10, 2019, s. 522–529.