Improved Chlorhexidine Carryover Performance Using the Alliance iS HPLC System

Význam tématu

V oblasti farmaceutické a biotechnologické analýzy je konzistence a přesnost výsledků HPLC kritická. Jedním z často opomíjených, avšak zásadních parametrů je přenos („carryover“) mezi po sobě jdoucími injekcemi. Nelze jej přehlížet, protože zvyšuje chyby kvantifikace i falešné detekce stopových polutantů či přídatných látek.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentované studie bylo porovnat úroveň carryover modelového analytu chlorhexidinu na pěti různých HPLC platformách, včetně systému Alliance iS od Waters. Zároveň byly ověřovány strategie minimalizace přenosu, zejména optimalizace mytí vstřikovací jehly.

Použitá metodika a instrumentace

Pro studii byla připravena:

• Výzva chlorhexidinem (1,13 mg/mL) a standard (11,3 µg/mL) v mobilní fázi A.
• Autosamplery: Alliance iS HPLC System, dva systémy Vendor X (HPLC 1 & 2), UHPLC Vendor Y (HPLC 3) a HPLC Vendor Z (HPLC 4).
• Kolona: XSelect HSS C18 (3 mm × 100 mm, 2,5 µm) při 30 °C.
• Detekce: UV na 5 µL injekcí, průtok 0,6 mL/min, gradient s mobilními fázemi TFA ve vodě/acetonitrilu.
• Mycí roztok jehly: 50:50 acetonitril:voda.
• Softwarová platforma: Empower 3.7.0.

Hlavní výsledky a diskuse

Studie rozlišila dva typy carryover:

• Volumetrické – způsobené slepými objemy v montážních spojích.
• Adsorpční – přilnutí analytu na povrch jehly či ostatních komponent.

Alliance iS s patentovanými beznástrojovými armaturami vyloučil většinu volumetrického přenosu. Standardní mytí jehly (2×1000 µL před a po injekci) navíc snížilo adsorpční carryover chlorhexidinu na pouhých 0,00055 %. Ostatní systémy bez výchozího mytí prokázaly až desetitisíckrát vyšší carryover. Doplnění myčích kroků na konkurenčních přístrojích rovněž výsledky zlepšilo, ale za cenu navýšeného cyklu o 30–214 s, zatímco Alliance iS zachoval krátký cyklus bez kompromisu na výkonu.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace beznástrojových spojů a optimalizovaného protokolu mytí v autosampleru:

• Minimalizuje riziko nesprávné montáže a volumetrického přenosu.
• Zaručuje reproducibilní a nízké carryover pro „lepkavé“ sloučeniny.
• Udržuje krátké analytické cykly bez časově náročných mycích postupů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj:

• Inteligentní automatické protokoly mytí řízené softwarem.
• Nové materiály s minimální adsorpcí pro vzorkovače.
• Modulární návrhy bez mrtvých objemů v celém průtoku.
• Integrace s prediktivní údržbou a kontrolou kvality v reálném čase.

Závěr

Studie ukázala, že systém Alliance iS HPLC, díky beznástrojovým armaturám a pokročilému mycímu protokolu jehly, dosahuje nejnižšího carryover chlorhexidinu ze všech testovaných přístrojů. Minimální míra přenosu bez prodloužení cyklu podtrhuje výhody této platformy v rutině QC/laboratořích.

Reference

1. USP–NF Monograph, Chlorhexidine Hydrochloride. USP; May 1, 2022.