HPLC
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceWaters
Význam tématu
Kompendiální chromatografické metody dle USP jsou široce používané v QA/QC farmaceutickém průmyslu. Jejich adaptace na moderní UHPLC/UPLC systémy umožňuje snížení doby analýzy a spotřeby rozpouštědel při zachování analytické výkonnosti.
Cíle a přehled studie
Cílem bylo ukázat, jak pomocí Waters Column Calculator škálovat USP assay pro quetiapin fumarát z původní kolony 5 µm (4,6×250 mm) na menší kolony (3,5 µm, 3,0×150 mm a 1,7 µm, 2,1×75 mm) a ověřit výkon na třech LC platformách: Alliance HPLC, ACQUITY Arc UHPLC a ACQUITY UPLC H-Class PLUS.
Použitá metodika a instrumentace
Analýza proběhla isokraticky s mobilní fází methanol : acetonitril : 2,6 g/L fosforečnan amonný (54 : 7 : 39), detekce PDA při 230 nm. Kolonové parametry a objemové toky byly přepočítány podle vztahu pro zachování poměru L/dp a výpočtů ve Waters Column Calculatoru.
- Alliance e2695 HPLC se 5 µm XBridge BEH C8 kolonu (4,6×250 mm)
- ACQUITY Arc UHPLC se 3,5 µm XBridge BEH C8 kolonu (3,0×150 mm)
- ACQUITY UPLC H-Class PLUS se 1,7 µm BEH C8 kolonu (2,1×75 mm)
- Waters Column Calculator, Empower 3
Hlavní výsledky a diskuse
- Poměr L/dp zůstal v mezích USP (-25 % až +50 %).
- Run time poklesl z 15 min na 7 min (3,5 µm) a na 3 min (1,7 µm).
- Spotřeba rozpouštědel se snížila o 66 % resp. 87 %.
- System suitability: rozlišení mezi impuritami a API >2, tailing <1,2, RSD plochy a retence <0,2 % splněny.
- Výsledky neznámého vzorku byly na všech systémech konzistentní (109 %), což potvrzuje reprodukovatelnost škálovaných metod.
Přínosy a praktické využití metody
- Zvýšení throughput a efektivity laboratoře.
- Snížení nákladů na rozpouštědla.
- Zachování validace USP metody při přechodu na moderní LC systémy.
Budoucí trendy a možnosti využití
- Další miniaturizace sub-2 µm kolon pro ultrarychlou separaci.
- Integrace hmotnostní spektrometrie pro vyšší selektivitu a senzitivitu.
- Automatizace a využití AI pro škálování a validaci metod.
- Grün analytická chemie se zaměřením na ekologičtější rozpouštědla a úsporu energie.
Závěr
Studie prokázala, že škálování USP assay pro quetiapin fumarát na menší kolony pomocí Waters Column Calculator výrazně zkracuje dobu analýzy a snižuje spotřebu rozpouštědel při zachování chromatografického výkonu a system suitability.
Reference
- Chapter <621> Chromatography. United States Pharmacopeia and National Formulary, USP 40-NF35 S1, 2017.
- Official Monographs, Quetiapine Fumarate USP 40 NF35 S1. United States Pharmacopeia and National Formulary, 2017.
- Snyder LR, Kirkland JJ, Dolan JW. Introduction to Liquid Chromatography, 3rd Ed. Wiley, 2010.
- Hong P, McConville PR. Dwell Volume and Extra-Column Volume: What Are They and How Do They Impact Method Transfer. Waters Corporation, 2016.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.