ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro IVD System: Analytical Performance for Androgens, Progestogens and Glucocorticoids

Význam tématu

Precizní stanovení androgenních, progestogenních a glukokortikoidních hormonů v lidském séru je klíčové pro diagnostiku endokrinních onemocnění, monitorování léčby a farmakologický výzkum. Kombinace ultrarychlé chromatografie UPLC s tandemovou hmotnostní spektrometrií (MS/MS) umožňuje vysoce citlivou a selektivní analýzu v komplexních biologických matricích.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo ověřit analytické parametry systému Waters ACQUITY UPLC I-Class spojeného s hmotnostním spektrometrem Xevo TQ-S micro IVD pro simultánní kvantifikaci sedmi steroidů: testosteronu, androstenedionu, 17-hydroxyprogesteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu, kortisolu, 11-deoxykortisolu a 21-deoxykortisolu ve vzorcích lidského séra.

Použitá instrumentace

• Chromatograf: ACQUITY UPLC I-Class s kolonou HSS T3 1,8 µm (2,1×50 mm) a prekolonou VanGuard HSS T3 (2,1×5 mm).
• MS detektor: Xevo TQ-S micro pracující v režimu MRM s ESI (+/−) a rozlišením MS1 a MS2 0,75 FWHM.
• Řídící software: MassLynx IVD v4.1, zpracování dat pomocí TargetLynx Application Manager.

Použitá metodika

Vzorky séra (100 µl) byly precipitovány metanolem, naředěny vodou, centrifugovány a extrahovány pomocí Oasis PRiME HLB µElution desorpčních destiček. Chromatografie probíhala gradientem mobilních fází s 2 mM acetátem amonným a 0,1 % kyselinou mravenčí ve vodě a methanolu při průtoku 0,6 ml/min. Hmotnostní spektrometr pracoval v režimu MRM pro cílenou detekci každého steroidu.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala vynikající chromatografickou selektivitu a linearitu (r2 > 0,99) napříč analytickými rozsahy od 0,09 do 43 000 nmol/l. Dolní kvantifikační mez (LLOQ) byla mezi 0,09 a 65 nmol/l s %RSD při LLOQ do 14 %. Celková přesnost a opakovatelnost QC vzorků nepřekročila 7,6 %. Externí porovnání se standardními EQA hodnotami ukázalo průměrnou odchylku bias do ±6 %. Tyto výsledky potvrzují robustnost a reprodukovatelnost metody.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlou, vysoce citlivou a multiplexní analýzu steroidů v klinických a výzkumných laboratořích. Široký dynamický rozsah a vynikající přesnost podporují diagnostiku poruch steroidogeneze, monitorování hormonální terapie i farmakokinetické studie.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření panelu analyzovaných steroidů a integrace s plně automatizovanými vzorkovými linkami. Vývoj softwarových nástrojů pro pokročilou datovou analýzu a umělou inteligenci může optimalizovat interpretaci výsledků a zrychlit klinické rozhodování. Rovněž je pravděpodobný přechod na miniaturizované systémy pro point-of-care testování.

Závěr

Systém Waters ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro IVD prokázal v testované aplikaci vysokou citlivost, selektivitu i reprodukovatelnost pro kvantifikaci klíčových steroidních hormonů v séru. Metoda splňuje požadavky moderní klinické a výzkumné analytiky a nabízí solidní základ pro rozšířené IVD aplikace.