Analysis of Doxorubicin Hydrochloride with the Agilent 1260 Infinity II Prime LC as per USP Monograph Method

Význam tématu

Analýza doxorubicinu hydrochloridu je klíčová v oblasti farmaceutické kontroly kvality a výzkumu antineoplastických léčiv. Modernizace farmakopejních metod přináší vyšší efektivitu, zkrácené doby analýz a kompatibilitu s UHPLC a MS technikami.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo ověřit použitelnost chromatografického systému Agilent 1260 Infinity II Prime LC pro kompendiální metodu analýzy doxorubicinu hydrochloridu podle USP 39 na sub-2 µm kolónách. Studie demonstruje

• seamless převod metod z konvenčního LC na UHPLC platformu,
• dodržení parametrů systému způsobilosti (SST) a přesnosti,
• hodnocení souvisejících látek.

Použitá metodika a instrumentace

Experiment probíhal na systému Agilent 1260 Infinity II Prime LC vybaveném:

• Flexible Pump (G7104C) schopným až 800 bar
• Multisampler (G7167A) a Multicolumn Thermostat (G7116A)
• Diode Array Detector HS (G7117C) při detekci 254 nm

Další součásti:

• Kolona: 2,1 mm × 10 cm, 1,7 µm L1 packing
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě; B: 80 % acetonitril/20 % methanol s 0,1 % TFA
• Gradient: 10 % B na počátku do 75 % B po 15 min, návrat na 10 % B do 16,1 min
• Průtok 0,5 mL/min, teplota kolony 35 °C, injekční objem 2 µL
• Software: Agilent OpenLab CDS verze 2.3.0

Hlavní výsledky a diskuse

System suitability test ukázal:

• relativní retence epirubicinu 1,05 min vs. referenční 1,05 min
• rozlišení mezi doxorubicinem a epirubicinem 2,9 (>1,5)
• %RSD plochy 0,11 % a %RSD ret. času 0,14 % (<0,73 %)

Přesnost opakovatelnosti (6 injekcí) a repeatability (25 injekcí) pro doxorubicin standard vykázaly velmi nízké RSD (<0,13 %). Test souvisejících látek pro čtyři analytické cíle (doxorubicin, doxorubicinon, daunorubicin, daunorubicinon) potvrdil RSD plochy a RT <1 %, rozlišení >4,7.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• vysokou robustnost a spolehlivost pro rutinní i výzkumné laboratorní aplikace
• možnost provozu jako HPLC či UHPLC s maximálním přetlakem 800 bar
• rychlejší analýzy a snížení spotřeby organických rozpouštědel

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry vývoje:

• další miniaturizace kolón a snížení dead volume
• integrace s hmotnostní spektrometrií pro pokročilou identifikaci produktů
• automatizace přípravy vzorků a vysoká propustnost

Závěr

Studie potvrzuje, že Agilent 1260 Infinity II Prime LC plně vyhovuje požadavkům USP monografie pro doxorubicin hydrochlorid, zajišťuje vynikající přesnost, opakovatelnost a rozlišení včetně testu souvisejících látek a nabízí flexibilitu provozu mezi HPLC a UHPLC režimy.

Reference

1. 3602 Official Monographs/Doxepin – USP 39.
2. Physical Tests/⟨621⟩ Chromatography 431 – USP 38.