Thermo Scientific SurePac™ Oligo RP MDi™ je bioinertní polymerní kolona s reverzní fází navržená speciálně pro HPLC a LC-MS analýzu oligonukleotidů a nukleových kyselin. Kombinuje monodisperzní supermakroporézní polymerní náplň Poly-DVB s kovuprostou průtokovou cestou, která omezuje nežádoucí interakce oligonukleotidů s kovovými povrchy. Výsledkem je vysoká výtěžnost, dobrý tvar píků a reprodukovatelné separace i u dlouhých, modifikovaných a analyticky náročných sekvencí.
Kolona je optimalizována pro iontově párovou chromatografii na reverzní fázi a je kompatibilní s běžně používanými ion-párovými systémy, například HFIP/TEA. Robustní polymerní stacionární fáze umožňuje práci v širokém rozsahu pH 2–12 a při teplotách až 90 °C, což podporuje rychlé gradienty, separaci blízce příbuzných sekvenčních variant a profilování nečistot v R&D i QC workflow.
Stacionární fáze Poly-DVB
SurePac Oligo RP MDi využívá polymerní stacionární fázi Poly-DVB (polydivinylbenzen). Na rozdíl od klasických silikagelových kolon poskytuje polymerní materiál vysokou stabilitu v širokém rozsahu pH a při zvýšených teplotách.
To je výhodné zejména při metodách pro oligonukleotidy, které mohou vyžadovat:
- vyšší pH,
- zvýšenou teplotu,
- vysoký podíl organického rozpouštědla,
- rychlé gradienty,
- opakované analýzy v rutinním QC.
Supermakroporézní struktura
Supermakroporézní polymerní částice jsou navrženy tak, aby umožnily efektivní přenos hmoty také u větších biomolekul.
Kolona tak podporuje analýzu:
- krátkých oligonukleotidů,
- terapeutických oligonukleotidů,
- dlouhých DNA/RNA sekvencí,
- modifikovaných oligonukleotidů,
- velmi dlouhých oligonukleotidů a větších nukleových kyselin.
Bioinertní hardware
Bezkovová průtoková cesta je důležitá zejména u oligonukleotidů, protože jejich fosfátové skupiny mohou interagovat s kovovými povrchy chromatografického systému.
Bioinertní konstrukce pomáhá:
- omezit adsorpci analytu,
- zlepšit výtěžnost,
- snížit tailing píků,
- zvýšit reprodukovatelnost,
- omezit ztráty nízko koncentrovaných nebo citlivých sekvencí.
To je výhodné zejména při spojení s inertními UHPLC systémy, například při biofarmaceutických LC-MS workflow.
Ion-pair RP LC-MS
SurePac Oligo RP MDi je optimalizována pro ion-párovou chromatografii s reverzní fází.
Kompatibilita s ion-párovými reagenciemi, například HFIP/TEA, umožňuje využívat kolonu pro LC-MS metody, kde je požadována:
- vysoká retenční reprodukovatelnost,
- dobrá chromatografická selektivita,
- účinná ionizace v MS,
- separace blízce příbuzných sekvencí,
- kvantifikace hlavní složky a nečistot.
Technické specifikace
- Typ kolony: analytická
- Separační mód: reverzní fáze
- Určení: analýza oligonukleotidů a nukleových kyselin
- Stacionární fáze: Poly-DVB
- Materiál náplně: polymerní
- Struktura pórů: supermakroporézní
- Velikost částic: 2,5 µm
- Doporučený průtok: 0,2–0,6 mL/min
- Maximální tlak: 448 bar / 6500 psi
- Teplotní rozsah: 5–90 °C
- Rozsah pH: 2–12
- Hardware: bioinertní / kovuprostá průtoková cesta
- Kompatibilní techniky: HPLC, UHPLC, LC-UV, LC-MS
Typické aplikace
- Terapeutické oligonukleotidy
- DNA oligonukleotidy
- RNA oligonukleotidy
- Chemicky modifikované oligonukleotidy
- Dlouhé oligonukleotidy
- Nukleové kyseliny
- Oligonukleotidové impurity profiling
- Kontrola zkrácených sekvencí
- LC-MS charakterizace
- LC-UV analýza
- Vývoj metod
- R&D
- Biofarmaceutická analýza
- QA/QC
