Thermo Scientific Orbitrap Tribrid Apex představuje novou generaci vysokorozlišovacích hybridních hmotnostních spektrometrů navržených pro komplexní strukturní charakterizaci, multiomické studie, biofarmaceutický výzkum a analýzu malých molekul. Platforma kombinuje kvadrupólový hmotnostní filtr, vysokokapacitní lineární iontovou past a Orbitrap analyzátor s pokročilou paralelizací iontových procesů, flexibilními MSⁿ workflow a širokou nabídkou fragmentačních technik. Díky tomu umožňuje rychlé získávání vysoce kvalitních dat, hlubší strukturní charakterizaci a citlivou analýzu složitých biologických i chemických vzorků.
Platforma je nabízena ve čtyřech aplikačně zaměřených edicích – Small Molecule, MultiOmics, Structural Biology a BioPharma – které vycházejí ze společné Tribrid architektury, ale přidávají funkce optimalizované pro konkrétní typy analytických úloh.
Klíčové vlastnosti
- Hybridní Tribrid architektura:
- QR5 segmentovaný kvadrupólový hmotnostní filtr
- vysokokapacitní lineární iontová past
- Orbitrap analyzátor
- Orbitrap rozlišení >480 000 FWHM
- Akviziční rychlost Orbitrap až 75 Hz v režimu TurboTMT
- MSⁿ analýza v lineární iontové pasti rychlostí až 100 Hz
- Dva Ion Routing Multipoles (IRM) pro paralelizaci iontových operací
- Prekurzorová izolace až do šířky 0,4 m/z
- Pokročilé fragmentační techniky:
- HCD
- CID
- ETD
- EThcD
- ETciD
- volitelně UVPD
- volitelně IRMPD
- Flexibilní víceúrovňová MSⁿ analýza
- Inteligentní akviziční strategie a Real-Time Library Search
- Auto-Ready 2 ion source pro automatizovanou a vzdálenou kalibraci
- Standardně olej-free dry pump pro snížení nároků na údržbu
- Možnost interní kalibrace EASY-IC s hmotnostní přesností pod 1 ppm
- Volitelné Native MS, PTCR a Direct Mass Technology workflow podle edice a konfigurace.
Čtyři aplikační edice
Orbitrap Tribrid Apex Small Molecule MS
Small Molecule Edition je optimalizována pro identifikaci a strukturní charakterizaci malých molekul v komplexních vzorcích. Umožňuje kombinovat několik ortogonálních fragmentačních mechanismů v rámci jednoho experimentu a využívat inteligentní MSⁿ akvizici pro objasňování struktur neznámých sloučenin.
Mezi hlavní aplikace patří:
- identifikace neznámých sloučenin,
- metabolomika a lipidomika,
- přírodní látky,
- cílená i necílená analýza,
- současná kvantifikace a discovery workflow.
SQUAD (Simultaneous Quantitation and Discovery) umožňuje spojit cílenou kvantifikaci s necíleným screeningem v jedné LC-MS analýze. Brožura uvádí lineární dynamický rozsah až 7 řádů a 40% rychlejší přepínání polarity oproti referenčnímu workflow.
Orbitrap Tribrid Apex MultiOmics MS
MultiOmics Edition je určena pro proteomiku, glykopeptidovou analýzu, lipidomiku a další omická workflow. Podporuje DDA, DIA, hybridní DIA, TMT a cílené PRM analýzy a využívá pokročilou paralelizaci iontových procesů a IR-asistovanou fragmentaci.
Typické aplikace:
- discovery proteomika,
- TMT multiplexní kvantifikace,
- cílená PRM analýza,
- glykopeptidy a další PTM,
- proteoformy,
- lipidomika a další multiomické studie.
IR-asistovaná EThcD zvyšuje účinnost fragmentace a pokrytí sekvence; výrobce v demonstrační studii uvádí přibližně 60 % více identifikovaných O-vázaných glykopeptidů oproti použitému referenčnímu systému.
Orbitrap Tribrid Apex Structural Biology MS
Structural Biology Edition kombinuje Native MS, top-down a MSⁿ přístupy pro studium proteinových komplexů, jejich struktury, interakcí a dynamiky. Platforma podporuje analýzu intaktních komplexů i detailní fragmentační experimenty v jediném systému.
V konfiguraci s Native MS:
- MS1 rozsah až m/z 16 000
- MS²/MSⁿ rozsah až m/z 20 000
- kvadrupólová izolace až m/z 12 000
- izolace v iontové pasti až m/z 8000.
Vhodné je například pro:
- intaktní proteinové komplexy,
- membránové proteiny,
- protein-protein interakce,
- Native MS,
- top-down analýzu,
- HDX-MS.
IR-asistované ETD a EThcD mohou při HDX-MS omezovat scrambling deuteria a umožnit detailnější lokalizaci strukturních změn.
Orbitrap Tribrid Apex BioPharma MS
BioPharma Edition je zaměřena na detailní charakterizaci bioterapeutik od intaktní molekuly přes middle-down až po peptide mapping. Uplatňuje se při analýze monoklonálních protilátek, ADC, oligonukleotidů a dalších komplexních biologických léčiv.
Typické aplikace:
- mAb charakterizace,
- antibody-drug conjugates (ADC),
- sekvenování protilátek,
- proteoformy,
- peptide mapping,
- top-down a middle-down workflow,
- oligonukleotidy a tRNA,
- lokalizace PTM a konjugačních míst.
Kombinace IR-EThcD a PTCR MS³ může snížit spektrální komplexitu vysoce nabitých iontů a zlepšit sekvenční pokrytí heterogenních bioterapeutik. Direct Mass Technology mode lze využít také při charakterizaci komplexních top-down a middle-down spekter.
Pokročilá iontová optika a paralelizace
Platforma využívá dva Ion Routing Multipóly:
- přední IRM provádí HCD na úrovni MS²,
- zadní IRM podporuje paralelní práci a HCD při MS³ a vyšších stupních.
Tato architektura umožňuje část iontových operací provádět souběžně, což zvyšuje rychlost komplexních MSⁿ workflow. QR5 segmentovaný kvadrupól s hyperbolickými povrchy podporuje úzkou izolaci prekurzorů až 0,4 m/z.
Fragmentační možnosti
Orbitrap Tribrid Apex poskytuje mimořádně širokou škálu fragmentačních mechanismů, které lze podle aplikace vzájemně kombinovat:
- CID – collision-induced dissociation
- HCD – higher-energy collisional dissociation
- ETD – electron transfer dissociation
- EThcD – ETD s doplňkovou HCD aktivací
- ETciD – ETD s doplňkovou CID aktivací
- UVPD – ultraviolet photodissociation, volitelně
- IRMPD – infrared multiphoton dissociation, volitelně
UV laser je zaměřen například na top-down proteomiku, oligonukleotidy a lipidomiku. IR laser podporuje mimo jiné fragmentaci reporterových iontů TMT, top-down MS a peptidové aplikace.
Direct Mass Technology mode
Volitelný Direct Mass Technology mode využívá single-ion detection a umožňuje přiřazovat náboj jednotlivých iontů bez nutnosti rozpoznávat klasické izotopové nebo nábojové obálky.
To je výhodné zejména pro:
- velké proteiny,
- proteinové komplexy,
- proteoformy,
- heterogenní bioterapeutika,
- komplexní top-down spektra.
Native MS
Volitelná konfigurace Native MS rozšiřuje platformu pro analýzu velkých makromolekulárních komplexů v jejich nativnějším stavu.
Podporuje:
- MS1 až m/z 16 000
- MS²/MSⁿ až m/z 20 000
- kvadrupólovou izolaci až m/z 12 000
- izolaci v iontové pasti až m/z 8000.
Inteligentní akvizice
Platforma podporuje pokročilé strategie, které rozhodují o dalším průběhu experimentu přímo během akvizice:
- Real-Time Library Search
- Adaptive Real-Time Library Search
- Smart Targeted TMT
- Spectral Library Directed MSⁿ
- předpřipravené metodické šablony
Tyto funkce pomáhají zaměřit přístrojový čas na relevantní prekurzory a omezit nepotřebné opakování analýz.
Dostupné edice a volitelné rozšíření
Přístrojové edice:
- B51008787 – Orbitrap Tribrid Apex Structural Biology MS
- B51008788 – Orbitrap Tribrid Apex BioPharma MS
- B51008789 – Orbitrap Tribrid Apex MultiOmics MS
- B51008790 – Orbitrap Tribrid Apex Small Molecule MS
Volitelné konfigurace uvedené výrobcem:
- B51008633 – UV-laser option for Tribrid MS
- B51008634 – IR-laser option for Tribrid MS
- B51009083 – Native MS option for Tribrid MS
- B51009084 – Direct Mass Technology mode option for Tribrid MS
Typické aplikace
- Proteomika a multiomika
- TMT a label-free kvantifikace
- Glykomika a glykopeptidová analýza
- PTM charakterizace
- Top-down a middle-down proteomika
- Native MS
- HDX-MS
- Strukturní biologie
- Monoklonální protilátky
- ADC a další bioterapeutika
- Oligonukleotidy a RNA
- Lipidomika
- Metabolomika
- Analýza malých molekul
- Identifikace neznámých látek
- Strukturní elucidace
- Cílená i necílená kvantifikace
