<h3><strong>Úvod</strong></h3>
<p><strong>Tricyklická antidepresiva</strong> (TCA) se běžně používají k úlevě od deprese, úzkostí a neuropatické bolesti. I přes to, že tyto léky mají závažné vedlejší účinky i při terapeutických dávkách, stále se předepisují, jelikož jsou účinnější než jiná antidepresiva. Monitoring hladin TCA v séru může zlepšit terapeutické zvládání deprese u pacientů, u kterých může dojít k problémům s mezilékovou interakcí či s toxicitou.</p>
<h3><strong>Metody</strong></h3>
<p>V posledních 30 letech se ke stanovení TCA nejčastěji používalo <a href="https://lcms.cz/library?categoryItems=12&amp;instrumentationItems=27&amp;mainauthorItems=3&amp;search=tricyclic"><strong>HPLC s UV detektorem</strong></a>.  Nicméně v poslední době stoupají požadavky na <strong>citlivost</strong>, <strong>selektivitu</strong> a <strong>specificitu</strong>, a to vedlo ke vzniku metod pro <a href="https://lcms.cz/library?categoryItems=12&amp;instrumentationItems=31&amp;mainauthorItems=3&amp;search=tricyclic"><strong>LC-MS jak pro diagnostiku TCA</strong></a>, tak i pro vývoj nových metod a léčiv.</p>
<p>V tomto článku se budeme věnovat metodě pro stanovení <strong>15 tricyklických antidepresiv v lidské plazmě či séru</strong>. Seznam těchto analytů můžete nalézt v tabulce č. 1. I když většina LC-MS metod pro stanovení těchto látek počítá s využitím <a href="https://lcms.cz/products?category=20&amp;manufacturerItems=3"><strong>hmotnostních spektrometrů na bázi trojitých kvadrupólů</strong></a>, v tomto článku se podíváme na data, která jsme získali použitím high-resolution accurate mass (HRAM) hmotnostní spektrometrie na hmotnostním spektrometru <a href="https://lcms.cz/products/403"><strong>Thermo Scientific™ Orbitrap Exploris™ 120</strong></a>.</p>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Pragolab_Tabulka_c_1_Seznam_analytu_a_internich_standardu_b8af38865c/Pragolab-Tabulka-c.1-Seznam-analytu-a-internich-standardu.jpg" alt="Pragolab: Tabulka č.1 Seznam analytů a interních standardů"/></p>
<h3><strong>Experiment</strong></h3>
<p>Vzorky <strong>krevní plazmy</strong> nebo <strong>séra</strong> byly extrahovány a podstoupily precipitaci proteinů. Extrahované vzorky byly poté nastříknuty do <strong>kapalinového chromatografu Thermo Scientific™ Vanquish™ Flex Binary UHPLC</strong>, který byl připojen k hmotnostnímu spektrometru <strong>Orbitrap Exploris 120</strong> se zdrojem <strong>HESI</strong>. Detekce analytů probíhala na <strong>full skenu</strong> v <strong>pozitivním ionizačním módu</strong> (přesné parametry nastavení MS naleznete v Tabulce č.2), který byl spojen s <strong>data-dependentní fragmentací</strong> (fullMS-ddMS2). Metoda byla poté vyhodnocena s použitím databáze <a href="https://lcms.cz/library?manufacturerItems=53-2&amp;search=ClinMass"><strong>ClinMass TDM Platform</strong></a> s ClinMass Add-On Setem pro Tricyklické Antidepresiva od společnosti <a href="https://lcms.cz/products?manufacturerItems=56"><strong>RECIPE Chemicals + Instruments GmbH</strong></a>.</p>
<h4><strong>Tabulka č. 2 Popis parametrů hmotnostního spektrometru</strong></h4>
<h5><strong>Ion source parameters</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Source type:</strong> High Electrospray Source Ionization (H-ESI)</li>
<li><strong>Polarity:</strong> Positive</li>
<li><strong>Spray voltage - Positive (V):</strong> 3,500</li>
<li><strong>Sheath gas (Arb):</strong> 50</li>
<li><strong>Aux gas (Arb):</strong> 10</li>
<li><strong>Sweep gas (Arb):</strong> 0</li>
<li><strong>Ion transfer tube temp. (°C):</strong> 300</li>
<li><strong>Vaporizer temp. (°C):</strong> 320</li>
</ul>
<h5><strong>Settings</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Mild trapping:</strong> No</li>
<li><strong>Data acquisition mode:</strong> Experiment 1: Full scan - ddMS²; Experiment 2: tMS² using a mass list inclusion</li>
<li><strong>Internal mass calibration:</strong> RunStart Easy-IC™</li>
</ul>
<h5><strong>Full scan parameters</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Orbitrap resolution (@ m/z 200):</strong> 60,000</li>
<li><strong>Scan range:</strong> 250–350</li>
<li><strong>RF lens (%):</strong> 70</li>
<li><strong>AGC target:</strong> Standard</li>
<li><strong>Maximum injection time mode:</strong> Auto</li>
</ul>
<h5><strong>Data-dependent MS² scan properties</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Orbitrap resolution (@ m/z 200):</strong> 15,000</li>
<li><strong>Isolation window (m/z):</strong> 2</li>
<li><strong>Collision energy type:</strong> Normalized</li>
<li><strong>HCD collision energy (%):</strong> 30</li>
<li><strong>Scan range mode:</strong> Auto</li>
</ul>
<h5><strong>Targeted MS² scan properties</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Orbitrap resolution (@ m/z 200):</strong> 30,000</li>
<li><strong>Isolation window (m/z):</strong> 2.0</li>
<li><strong>Collision energy type:</strong> Normalized</li>
<li><strong>HCD collision energy (%):</strong> 30</li>
</ul>
<h3><strong>Výsledky</strong></h3>
<p><strong>Procentuální zkreslení</strong> mezi nominálními a zpětně vypočítanými koncentracemi byla vždy <strong>v rozmezí ±15%</strong> pro všechny kalibrátory. <strong>LLOQ</strong> hodnoty pro všechny analyty můžete nalézt níže (Tabulka č. 3). Při analýze <strong>blank vzorku</strong> nedošlo k detekci žádného signálu, a to ani poté, co byl blank nastříknut po nejkoncentrovanějším kalibrátoru. S touto metodou jsme dosáhli <strong>dobré přesnosti</strong> a <strong>reprodukovatelnosti</strong>, kdy <strong>maximální %CV bylo vždy pod 7,1% a 4,2% pro intra- a inter-assay přesnost</strong>.</p>
<h4><strong>Tabulka č. 3 LLOQs pro všechny analyty</strong></h4>
<h5><strong>Analyte / LLOQ (μg/L)</strong></h5>
<ul>
<li>Amitriptyline / 3.26</li>
<li>Clomipramine / 18.3</li>
<li>Clozapine / 5.85</li>
<li>Desipramine / 1.81</li>
<li>Doxepin / 14.8</li>
<li>Imipramine / 3.34</li>
<li>Maprotiline / 24.2</li>
<li>Norclomipramine / 21.1</li>
<li>Norclozapine / 9.46</li>
<li>Nordoxepin / 0.680</li>
<li>Normaprotiline / 3.34</li>
<li>Nortrimipramine / 2.20</li>
<li>Nortriptyline / 1.82</li>
<li>Protriptyline / 3.38</li>
<li>Trimipramine / 2.73</li>
</ul>
<p>Pokud se chcete dozvědět více, přečtěte si kompletní <a href="https://www.pragolab.cz/files/clanky/2022-01/tn-66058-lc-hram-ms-15-tricyclic-antidepressants-human-plasma-serum-tn66058-en.pdf"><strong>aplikační nótu</strong></a>.</p>
<h3><strong>Přehled nejnovějších dokumentů zaměřených na LC/Orbitrap z oblasti Klinická analýza od Thermo Fischer Scientific <a href="https://lcms.cz/library?categoryItems=12&amp;from=2021&amp;instrumentationItems=31-33-30-32&amp;mainauthorItems=3&amp;to=2022">v knihovně LabRulezLCMS</a></strong></h3>
<ul>
<li><p><strong>ASMS 2021: Analysis of Intact Resistance Markers for Metallo-b-Lactamases in Bacterial Pathogens</strong> (Postery | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>ASMS 2021: High-Flow LC/MS Analysis of Immunosuppressant Drugs in Human Blood Using FAIMS Technology</strong> (Prezentace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>ASMS 2021: A Fully Automated High-Throughput, Deep-Scale Quantitative Plasma Proteomics Workflow Enables Quantitively Profile More Than 1000 Proteins Per Sample</strong> (Postery | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>ASMS 2021: Characterization of Adeno-Associated Viral assemblies on an Ultra-High Mass Range Hybrid Quadrupole-Orbitrap Mass Spectrometer</strong> (Postery | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>ASMS 2021: Identifying Antibiotic Resistance Through Direct Detection of Intact Enzymes from Bacterial Lysates using LC-MS/MS: Exploring MRSA and Carbapenem Resistance</strong> (Postery | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>ASMS 2021: An intelligent Hybrid-DIA data acquisition strategy for cracking the clinical sample complexity challenge in translational proteotyping</strong> (Postery | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of 27 antiepileptics in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of 36 antidepressants in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of four immunosuppressants in human blood by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of 35 benzodiazepines in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>LC-MS for detection of SARS-CoV-2 viral and host proteins</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of immunosuppressants in human blood by LC-HRAM mass spectrometry for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of 25-hydroxyvitamin D2 and D3 in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of eight antimycotics in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of total homocysteine in human plasma or serum by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of free metanephrines in human plasma by LC-HRAM mass spectrometry for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of 34 benzodiazepines in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of 15 tricyclic antidepressants in human plasma or serum by LC-HRAM-MS for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Quantification of mycophenolic acid in human plasma using an Orbitrap Exploris 120 high- resolution mass spectrometer for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
<li><p><strong>Fast LC-HRAM-MS quantification of 36 antidepressants in human plasma using the Orbitrap Exploris 120 mass spectrometer for clinical research</strong> (Aplikace | 2021)</p>
</li>
</ul>


Kvantifikace 15 tricyklických antidepresiv v lidské plazmě či séru

<p><strong>Těšit se můžete na:</strong></p>
<ul>
<li>zajímavé přednášky</li>
<li>ukázky přístrojů</li>
<li>bohaté občerstvení</li>
</ul>
<h5><strong>V rámci semináře Vás srdečně zveme na interaktivní workshop nad produkty:</strong></h5>
<ul>
<li><a href="https://lcms.cz/library?search=Metaboauto"><strong>Metaboauto</strong></a> &amp; PAL 3 CTC - stanovení metabolomitů</li>
<li><a href="https://lcms.cz/products/396"><strong>Vanquish</strong></a> Flex &amp; <a href="https://lcms.cz/products?manufacturerItems=56"><strong>RECIPE</strong></a> - stanovení vit. A/E</li>
<li><a href="https://lcms.cz/products/125"><strong>Iontové zdroje Plasmion</strong></a> – analýza dechu</li>
<li><a href="https://lcms.cz/library?manufacturerItems=2&amp;search=Evosep"><strong>Evosep One</strong></a> – klinická proteomika</li>
</ul>
<h5><strong>Přednášející:</strong></h5>
<ul>
<li><strong>prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D.</strong> (Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové)</li>
<li><strong>Mgr. Marie Vajrychová, Ph.D.</strong> (Centrum biomedicínského výzkumu, Fakultní nemocnice Hradec Králové)</li>
<li><strong>doc. RNDr. David Friedecký, Ph.D.</strong> (Oddělení klinické biochemie, Fakultní nemocnice Olomouc)</li>
<li><strong>Hans-Joachim Hübschmann</strong> (CTC Analytics AG)</li>
<li><strong>Ing. Martin Moos, Ph.D.</strong> (Biologické Centrum AV ČR)</li>
<li><strong>Thomas Ristau</strong> (RECIPE)</li>
<li><strong>Edward Goucher</strong> (Thermo Fisher Scientific)</li>
<li><strong>Erik Verschuuren</strong> (Evosep Biosystems)</li>
<li><strong>Mgr. Lukáš Najdekr, Ph.D.</strong> (Ústav molekulární a translační medicíny Lékařské fakulty Univerzity Palackého, Olomouc)</li>
<li><strong>Dr. Jan Buček</strong> (Plasmion)</li>
</ul>
<p>Z důvodu omezené kapacity se prosím registrujte v <a href="https://forms.office.com/Pages/ResponsePage.aspx?id=aR-wpy9pT0iMxW5H7RJK8WO2jiQLb7NOszjVkgYyezJUMUU1M1ZHU0c2WFpVMlQxSlFDNDFGUVhXTC4u"><strong>přihlašovacím formuláři</strong></a> nejpozději do <strong>11.11.2022</strong>.</p>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Pragolab_and_Partners_Hmotnostni_spektrometrie_v_klinicke_analyze_Mass_Spectrometry_in_Clinical_Analysis_ee3c7d0d64/Pragolab-and-Partners-Hmotnostni-spektrometrie-v-klinicke-analyze-Mass-Spectrometry-in-Clinical-Analysis.webp" alt="Pragolab &amp; Partners: Hmotnostní spektrometrie v klinické analýze / Mass Spectrometry in Clinical Analysis"/></p>
<h3><strong>Program</strong></h3>
<h5><strong>08:30 Registrace a welcome coffee</strong></h5>
<h5><strong>09:00 Zahájení</strong></h5>
<ul>
<li>Lukáš Plaček, František Zaleš a Zuzana Snížková (Pragolab)</li>
</ul>
<h4><strong>Automatizovaná příprava vzorků</strong></h4>
<h5><strong>09:05 Moderní trendy v přípravě vzorku pro analýzu separačními technikami</strong></h5>
<ul>
<li>Lucie Nováková (Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové)</li>
</ul>
<h5><strong>09:55 Automated Sample Preparation for Life Sciences and Clinical Analysis</strong></h5>
<ul>
<li>Hans-Joachim Hübschmann (CTC Analytics AG)</li>
</ul>
<h5><strong>10:15 Platforma automatizované přípravy vzorků pro on-line xC-MS metabolomiku</strong></h5>
<ul>
<li>Martin Moos (Biologické Centrum AV ČR)</li>
</ul>
<h5><strong>10:35 Coffee break</strong></h5>
<h4><strong>Hmotnostní spektrometrie malých molekul</strong></h4>
<h5><strong>11:00 Hmotnostní spektrometrie v diagnostice a léčbě</strong></h5>
<ul>
<li>David Friedecký (Oddělení klinické biochemie, Fakultní nemocnice Olomouc)</li>
</ul>
<h5><strong>11:20 Therapeutic Drug monitoring with <a href="https://lcms.cz/library?manufacturerItems=2-53&amp;search=ClinMass">ClinMass® LCMS Kit System</a></strong></h5>
<ul>
<li>Thomas Ristau (RECIPE)</li>
</ul>
<h5><strong>11:40 Advances in LC-MS Workflows and Orthogonal Technologies for Clinical Research</strong></h5>
<ul>
<li>Edward Goucher (Thermo Fisher Scientific)</li>
</ul>
<h5><strong>12:00 Oběd</strong></h5>
<h4><strong>Klinická proteomika a metabolomika</strong></h4>
<h5><strong>13:00 (“MS-based”) Proteomika v biomedicínském výzkumu</strong></h5>
<ul>
<li>Marie Vajrychová (Centrum biomedicínského výzkumu, Fakultní nemocnice Hradec Králové)</li>
</ul>
<h5><strong>13:20 <a href="https://lcms.cz/library?manufacturerItems=2&amp;search=Evosep">Evosep One</a>: Making sample separation 10 times faster and 100 times more robust, to enable Clinical Proteomics Studies</strong></h5>
<ul>
<li>Erik Verschuuren (Evosep Biosystems)</li>
</ul>
<h5><strong>13:40 Molecular profiling of cardiovascular diseases applying untargeted lipidomics approach</strong></h5>
<ul>
<li>Lukáš Najdekr (Ústav molekulární a translační medicíny Lékařské fakulty Univerzity Palackého, Olomouc)</li>
</ul>
<h5><strong>14:00 Empowering Clinical Diagnostics with <a href="https://lcms.cz/products/125">SICRIT® Ionization Technology</a></strong></h5>
<ul>
<li>Jan Buček (Plasmion)</li>
</ul>
<h5><strong>14:30 Interaktivní workshop s kávou</strong></h5>
<p>Zde budete mít možnost <strong>osobně si promluvit</strong> se zástupci jednotlivých společností a probrat Vaše konkrétní <strong>otázky</strong>, <strong>požadavky</strong>, <strong>představy</strong> či <strong>zkušenosti</strong>.</p>
<p>Vždy bude přítomen i zástupce naší společnosti, který zajistí překlad, bude-li potřeba. Setkání si prosím předběžně zarezervujte v rámci <a href="https://forms.office.com/Pages/ResponsePage.aspx?id=aR-wpy9pT0iMxW5H7RJK8WO2jiQLb7NOszjVkgYyezJUMUU1M1ZHU0c2WFpVMlQxSlFDNDFGUVhXTC4u"><strong>registračního formuláře</strong></a>.</p>
<h5><strong>16.30 Zakončení</strong></h5>
<p><strong>Akce bude probíhat v českém a anglickém jazyce a primárním jazykem bude čeština.</strong></p>
<p><strong>Váš tým Pragolab s.r.o.</strong></p>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Pragolab_and_Partners_Hmotnostni_spektrometrie_v_klinicke_analyze_Mass_Spectrometry_in_Clinical_Analysis_ee3c7d0d64/Pragolab-and-Partners-Hmotnostni-spektrometrie-v-klinicke-analyze-Mass-Spectrometry-in-Clinical-Analysis.webp" alt="Pragolab &amp; Partners: Hmotnostní spektrometrie v klinické analýze / Mass Spectrometry in Clinical Analysis"/></p>


Hmotnostní spektrometrie v klinické analýze / Mass Spectrometry in Clinical Analysis

Aplikace

Článek

Produkt

Nejbližší akce

Jsme jedním z lídrů na českém a slovenském trhu v oblasti laboratorních zařízení a svým zákazníkům přinášíme špičkové přístroje z oboru analytické chemie a fyzikálních měření více než 25 let.

Pragolab

RADANAL s.r.o.

Je společnost zabývající se výzkumem a vývojem, prodejem a aplikační podporou chromatografických metod včetně chromatografického spotřebního materiálu. Společnost je organizátorem mezinárodní konference INDC a konference VITATOX.

Pragolab s.r.o.

Jsme česká společnost dodávající kvalitní laboratorní přístroje z oboru analytické chemie a fyzikálních měření. Již 30 let máme zastoupení na českém a slovenském trhu.

Vitamin status B1, B2 and B6

RECIPE ClinMass® TDM 200 Kit System

Chronic Alcohol Abuse - Biomarkers in clinical diagnostics EtG/EtS and CDT

RECIPE HPLC & LC-MS/MS IVD Complete Kits - Product Catalogue I

ClinLab® EC6000 - Measurement of Biogenic Amines

Newborn Screening and Detection of Metabolic Disorders

Smart Steroid Profiling - Detection of metabolic disorders

VITATOX: Therapeutic Drug Monitoring (TDM) of Antibiotics by LC MS/MS

Vaše volba v diagnostice HPLC a LC-MS/MS. RECIPE je jedním z předních poskytovatelů CE-IVD v klinické diagnostice s rostoucí nabídkou řešení souprav pro HPLC a LC-MS/MS, kalibrátorů a kontrol, interních standardů a nástrojů. 

RECIPE

RECIPE Interní standardy ClinMass®

Vnitřní standardy ClinMass® jsou určeny především k použití s kompletními soupravami LC-MS/MS.

Vnitřní standardy ClinMass® jsou určeny především k použití s kompletními soupravami LC-MS/MS. Kromě toho mohou být použity jako IVD činidla nezávislá na soupravě pro implementaci nebo ověření interních metod.

<p>Další informace k interním standardům ClinMass® naleznete na <a href="https://recipe.de/internal-standards/">webu RECIPE</a>.</p>


RECIPE Interní standardy ClinMass®

Novinky

Hmotnostní spektrometrie v klinické analýze / Mass Spectrometry in Clinical Analysis

Kvantifikace 15 tricyklických antidepresiv v lidské plazmě či séru

Aplikace (2)

Brožury (5)

Ostatní (2)