SmartMS-ENABLED LC-MS SYSTEM FOR BIOTHERAPEUTIC DEVELOPMENT IN REGULATED/NON-REGULATED ENVIRONMENTS

Význam tématu

Analýza bioterapeutik pomocí LC-MS je nezbytná pro kvantitativní a kvalitativní kontrolu komplexních molekul, jako jsou monoklonální protilátky a jejich konjugáty. Díky vysoké citlivosti a selektivitě poskytuje detailní informace o poměru účinné látky k protilátce (DAR), modifikačních stavech peptidů a glykosylaci, což je klíčové pro vývoj, validaci a regulační compliance biolfarmak.

Cíle a přehled studie

Studie představuje platformu BioAccord – kompaktní SmartMS-enabled LC-MS systém – a demonstruje jeho schopnosti při:

• intaktní analýze ADC vzorků a stanovení DAR hodnot,
• peptidovém mapování u vzorků podrobených nucené degradaci,
• monitoringu nejhojnějších glykoform glykosylovaných protilátek.

Porovnává se výkon s interními referenčními metodami (HIC, QTof, UV-MS) a hodnotí se reprodukovatelnost výsledků.

Použitá metodika a instrumentace

Systém BioAccord kombinuje ACQUITY UPLC I-Class LC s ACQUITY RDa detektorem a UNIFI softwarem pro plně automatizované workflow.

• Intaktní analýza: Native SEC-MS na Protein BEH SEC kolonce, isokratická eluce v 50 mM NH4OAc, m/z 400–7000.
• Peptidová analýza: Trypsinová digesce, RP-UPLC na XSelect CSH C18 kolonce, MS/MS v módu fragmentation, m/z 50–2000.
• Reprodukovatelnost: Humanizovaný mAb standard na Protein BEH C4 kolonce, měření intra- i inter-systémové stability glykoformního profilu.

Hlavní výsledky a diskuse

BioAccord prokázal:

• Porovnatelné DAR hodnoty (0, 2, 4, 6) s referenčními HIC a QTof metodami.
• Spolehlivou detekci modifikovaných peptidů v nucené degradaci, potvrzenou vysokorychlostními fragmentačními spektry.
• Vysokou reprodukovatelnost glykoformního profilu s %RSD <10 % v čase (90 dní) i mezi šesti různými systémy.

Přínosy a praktické využití metody

BioAccord nabízí:

• jednoduchou obsluhu pro uživatele s různou úrovní zkušeností,
• kompaktní laboratorní stopu,
• automatizované workflow a reportování v souladu s regulačními požadavky.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření SmartMS funkcí:

• hlubší integrace s LIMS a datovými platformami,
• rozšíření do oblastí proteomiky a metabolomiky,
• pokročilé algoritmy pro automatickou interpretaci složitých datových souborů.

Závěr

BioAccord SmartMS-enabled LC-MS systém nabízí vysoce výkonné, reprodukovatelné a uživatelsky přívětivé řešení vhodné pro rutinní i pokročilé analýzy bioterapeutik v regulovaných i neregulovaných prostředích.

Reference

Shion H.; Ly M.; Ranbaduge N.; Zhang X.; Alelyunas Y.; Yu Y.Q.; Rouse J.; Chen W. SmartMS-Enabled LC-MS System for Biotherapeutic Development in Regulated/Non-Regulated Environments. Waters Corporation; Pfizer, Inc., 2019.