Příprava vzorků, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceAgilent Technologies
Význam tématu
Různé organické kontaminanty v potravinářských kořeních jako červená paprika a kurkuma představují riziko pro veřejné zdraví, zejména při intenzivním používání pesticidů, mykotoxinů, pyrrolizidinových alkaloidů a nelegálních barviv. Složitá matice koření ztěžuje analýzu reziduí a vyžaduje spolehlivou metodu s vysokou citlivostí, selektivitou a schopností zvládnout široké spektrum analyzovaných látek.
Cíle a přehled studie / článku
Studie si kladla za cíl vyvinout jednorázovou UHPLC–MS/MS metodu pro simultánní stanovení přes 235 pesticidů, 20 pyrrolizidinových alkaloidů, 9 mykotoxinů a 6 nelegálních barviv v práškovém koření. Použit byl Agilent EMR–Lipid QuEChERS vzorek očistný postup a vysoce citlivý Agilent 6495 Triple Quadrupole LC/MS v kombinaci s UHPLC systémem 1290 Infinity II.
Použitá metodika a instrumentace
Pro přípravu vzorků byla aplikována modifikovaná QuEChERS metodika:
- Hydratace 2 g sušeného koření vodou a následná extrakce 1 % kyselinou octovou v acetonitrilu.
- QuEChERS AOAC extrakční sůl (MgSO4, NaOAc) a následná dSPE očista EMR–Lipid.
- Polish krok ve speciální EMR–Lipid tubě s MgSO4 a NaCl pro odstranění zbylých lipidů a pigmentů.
- Agilent 1290 Infinity II UHPLC s kolonou ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 (2,1×150 mm, 1,8 µm).
- Gradientní eluční systém s 5 mM formiátu amonného a 0,1 % kyselinou ve vodě/methanolu, průtok 0,5 mL/min.
- Agilent 6495 Triple Quadrupole LC/MS s elektrospray ionizací Jet Stream.
- Režim dynamického MRM s přepínáním polarity, optimalizovaná kolizní energie.
- Matrix-matched kalibrační křivky 0,02–100 ng/mL (pesticidy, barviva, mykotoxiny) a 0,004–20 ng/mL (aflatoxiny, PA).
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda dosáhla následujících výkonů:
- Obnovení (recovery) 70–130 % pro 73 % sledovaných látek v červené paprice a 79 % v kurkumě.
- LOQ pod většinou regulačních hranic MRL Evropské komise.
- RSD triplikátů nižší než 20 %, prokázaná vysoká příměrnost kalibrací (R2 > 0,99).
- Výrazné snížení matricových efektů díky EMR–Lipid cleanup.
Přínosy a praktické využití metody
Popisovaná jednoduše nastavitelná metoda nabízí:
- Vysoce selektivní a citlivou kvantifikaci stovek reziduí v jediné analýze.
- Vysokou robustnost a prodloužení životnosti kolony díky efektivnímu odstranění interferujících složek.
- Vhodnost pro rutinní QA/QC kontroly, regulační monitoring a exportní inspekce koření.
Budoucí trendy a možnosti využití
Možné směřování dalšího vývoje:
- Rozšíření metody na další druhy koření a potravinové matrice.
- Integrace vysoce rozlišené hmotnostní spektrometrie (HRMS) pro nesledované contaminanty.
- Automatizace a robotizace vzorkovacího a clean-up procesu pro zvýšení throughput.
- Propojení s digitálními databázemi a AI-podporovanou analýzou dat pro rychlejší vyhodnocení.
Závěr
Vyvinutá UHPLC–MS/MS metoda s EMR–Lipid QuEChERS očistou prokázala vynikající citlivost, přesnost a reprodukovatelnost při simultánním stanovení širokého spektra pesticidů, mykotoxinů, alkaloidů a barviv v práškovém koření. Metoda je vhodná pro spolehlivý monitoring reziduí v potravinách v souladu s regulačními požadavky.
Reference
- QuEChERS Sample Preparation Manual, Agilent Technologies, publication number 5991-3326EN.
- EMR–Lipid Brochure a Recommended protocols for EMR–Lipid, Agilent Technologies, publication number 5991-6052EN a 5991-6057EN.
- Regulation (EC) No 396/2005 on maximum residue levels of pesticides.
- Pesticides and Environmental Pollutants MRM database G9250AA.
- Guidance document SANCO/12571/2013 on analytical quality control and validation.
- H. Stahnke et al., Anal. Chem. 84, 1474–1482 (2012).
- APEDA Export Regulations, apeda.gov.in.
- Method Validation procedures for pesticide residues analysis, SANCO/12571/2013.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.