Cannabinoid Profiling and Quantitation in Hemp Extracts using the Agilent 1290 Infinity II/6230B LC/TOF system

Význam tématu

Přesné stanovení složení a koncentrací kanabinoidů v extraktech z konopí je klíčové pro zajištění kvality, bezpečnosti a souladu s legislativními požadavky. Různé kanabinoidy (CBD, THC, CBG, CBDA, THCA apod.) mají odlišné farmakologické účinky a koncentrace psychoaktivního Δ9-THC musí být pečlivě kontrolována, zejména u výrobků označovaných jako „hempské“ s maximem 0,3 % THC. Moderní analytické metody nabízejí způsoby, jak rychle a spolehlivě kvantifikovat kanabinoidy v širokém rozsahu koncentrací.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit postup pro cílené profilování a kvantitativní stanovení 11 nejčastěji sledovaných kanabinoidů v extraktech z konopí pomocí systému Agilent 1290 Infinity II UHPLC spojeného s hmotnostním spektrometrem Agilent 6230B TOF. Metoda měla zajistit vynikající chromatografické rozlišení, nízké meze detekce (LOD) a široký dynamický rozsah kalibrace pro současné stanovení vysokých i nízkých koncentrací kanabinoidů.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky komerčně dostupných konopných olejů byly připraveny zředěním v dichlormethanu a následnou 10× dilucí v methanolu. Kalibrátory standardních směsí pokrývaly koncentrace od 10 µg/mL až po 5 000 µg/mL. Chromatografie probíhala na sloupci ZORBAX Bonus RP (2,1 × 50 mm, 1,8 µm) při 50 °C, mobilní fáze sestávala z vody, methanolu a vodného roztoku 0,1% kyseliny mravenčí s amoniakem, gradientní eluce při 0,5 mL/min. Detekce zahrnovala UV signál při 230 nm a vysokorozlišovací TOF-MS v kladném režimu ESI s rozsahem m/z 100–1 700 a rychlostí akvizice 1 Hz.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II UHPLC Quaternary Pump s DAD detektorem
• Agilent 6230B Time-of-Flight hmotnostní spektrometr
• Kolona Agilent ZORBAX Bonus RP, 2,1 × 50 mm, 1,8 µm

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla plného chromatografického rozlišení klíčových kanabinoidů včetně rozlišení Δ8-THC a Δ9-THC. Pro všechny analyty byla stanovena lineární závislost s koeficientem R2 ≥ 0,999. LOD pro THC činilo 1,0 ng/mL (S/N = 3:1) a LOQ 3,0 ng/mL (S/N = 10:1). Profilování sedmi komerčních vzorků ukázalo vysoké koncentrace CBD (>400 mg/mL u neředěných olejů) a nízké úrovně THC (pod legislativní hranicí 0,3 %). Použití osobní databáze (PCDL) s přesnou hmotností a retenčními časy umožnilo spolehlivou identifikaci i v silně maticových vzorcích.

Přínosy a praktické využití metody

• Široký dynamický rozsah pro současné stanovení vysokých i stopových koncentrací kanabinoidů.
• Vyšší specifita díky vysokorozlišovací MS ve srovnání s UV detekcí.
• Rychlá a jednoduchá příprava vzorku bez náročného čistění.
• Podpora legislativních a kvalitativních testů v průmyslových i výzkumných laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj kombinace vysokorozlišovacích technik (HRMS) s iontovou mobilitou a pokročilou datovou analýzou pro komplexní toxikologická a metabolomická studia. Posun k automatizovaným řetězcům vzorkování a udržitelným postupům (ekologičtí rozpouštědla, miniaturizace) podpoří vysokokapacitní screening potravin, kosmetiky a farmaceutických výrobků. Rozšíření spektrálních databází usnadní odhalování nových kanabinoidů a jejich derivátů.

Závěr

Vyvinutá LC-TOF metoda poskytuje robustní, citlivé a specifické stanovení 11 klíčových kanabinoidů v konopných extraktech. Vynikající chromatografické rozlišení, nízké meze detekce a podpora přesného stanovení empirických vzorců dělají z této metody vhodný nástroj pro výzkum i rutinní kontrolu kvality hempských produktů.

Reference

Žádné literární zdroje nebyly uvedeny.