Agilent InfinityLab 2D-LC Solutions

Význam tématu

2D-LC představuje pokročilou chromatografickou techniku umožňující rozdělení složitých vzorků s vysokou reliabilitou a rozlišením.
V praxi odstraňuje překryvy koelujících látek, zvyšuje vrcholovou kapacitu a přináší informace o spojení do jednoho zautomatizovaného běhu.

Cíle a přehled článku

Článek představuje rodinu Agilent InfinityLab 2D-LC Solutions určenou k rychlému řešení náročných separací.
Klíčové cíle jsou:

• zvýšit produktivitu laboratoří
• zjednodušit workflow a eliminovat offline kroky
• dosáhnout maximální ortogonality a rozlišení analyzovaných látek

Použitá metodika a instrumentace

Pro dvoudimenzionální separaci byly využity následující principy:

• mód heart-cutting a více heart-cutů pro cílenou analýzu
• comprehensive 2D-LC (LC×LC) pro komplexní profilování vzorku
• Active Solvent Modulation (ASM) pro eliminaci vlivu 1D elučního roztoku na 2D separaci
• nízkoobjemové spoje a vysoce přesné gradienty pro reprodukovatelnost

Instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity II High Speed Pump (1D a 2D dimenze)
• Agilent 1290 Infinity II Diode Array Detector
• Agilent 1290 Infinity II Multisampler
• Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat
• specializované 2D-LC ventily (heart-cutting, multiple heart-cutting)
• ASM ventil pro aktivní složení mobilní fáze
• OpenLab CDS ChemStation Edition pro řízení 2D-LC a analýzu dat

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny testované módy 2D-LC prokázaly výrazné zvýšení vrcholové kapacity a rozlišení:

• Pharma: jeden běh pokryl až 11 odstřižků pro skrytá nečistoty, zlepšená kvantifikace
• Biopharma: automatické odsolení a MS detekce terapeutických peptidů bez offline úprav
• Forenzní toxikologie: snížení iontového potlačení u kanabinoidů, reprodukovatelnost RSD < 2 %
• Potravinářství: fingerprint profil piva s komplexními hořčinami, rozlišení cis/trans izomerů
• PK studie: nahrazení šesti 1D metod jediným během, úspora času 75 %
• Monoklonální protilátky: simultánní analýza agregátů a variant náboje
• Oligonukleotidy: online odsolení, eliminace ztrát při manuálním čistění

Diskuse potvrdila vysokou robustnost ventilů a stabilitu retenčních časů i při přepínání módů.

Přínosy a praktické využití metody

2D-LC nabízí:

• kompletní přehled složitého vzorku v jednom běhu
• eliminaci offline příprav, redukci chyb a posílení automatizace
• nové možnosti kvantifikace a charakterizace v QA/QC i výzkumu
• flexibilní přizpůsobení módu podle analytické úlohy

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směřování vývoje:

• integrované AI/ML nástroje pro optimalizaci gradientů a identifikaci vzorků
• propojení s HRMS pro hlubokou molekulární charakterizaci
• miniaturizace a micro-2D-LC formáty pro úsporu spotřebního materiálu
• ekologické mobilní fáze s nižší toxicitou a spotřebou organických rozpouštědel

Závěr

Agilent InfinityLab 2D-LC Solutions významně rozšiřují analytické možnosti moderních laboratoří.
Vysoká ortogonality, automatizace a robustní instrumentace přináší rychlé, spolehlivé a opakovatelné výsledky napříč obory.

Reference

• Agilent Application Note 5991-5643EN: Impurity analysis of pharmaceuticals
• Agilent Application Note 5991-8437EN: Automated desalting for therapeutic peptides
• Agilent Application Note 5991-7859EN: Forensic cannabinoid analysis
• Agilent Application Note 5991-5521EN: Beer fingerprint profiling
• Agilent Application Note 5991-8839EN: Pharmacokinetic drug/metabolite studies
• Agilent Application Note 5991-6906EN: Monoclonal antibody characterization
• Agilent Application Note 5991-9490EN: Oligonucleotide desalting and analysis