A High Sensitivity LC/MS/MS Method with QuEChERS Sample Pre-treatment for Analysis of Afatoxins in Peanut Butter Samples

Význam tématu

Aflatoxiny představují vysoce toxické sekundární metabolity hub rodu Aspergillus, které se v podmínkách zvýšené vlhkosti často vyskytují v arašídovém másle a dalších potravinách. Jejich přítomnost podléhá přísným regulačním limitům z důvodu rizika pro lidské zdraví.

Cíle a přehled studie

Cílem práce bylo vyvinout vysoce citlivou a současně rychlou metodu pro kvantitativní stanovení aflatoxinů B1, B2, G1 a G2 v matrici arašídového másla. Studie se zaměřila na porovnání tradičních imunoafinitních postupů s levnější a jednodušší QuEChERS přípravou vzorku.

Použitá metodika

Pro přípravu vzorku bylo použito modifikované QuEChERS extrakční sady. Dvě gramy vzorku byly extrahovány směsí hexanu a ACN:H₂O (86:14) s 0,1 % kyseliny mravenčí, následovala očista na dSPE matricích obsahujících MgSO₄, PSA a C18. Filtrát byl ředěn a filtrován PTFE mikropórem.

Použitá instrumentace

Pro analýzu byla využita chromatograficko-hmotnostní soustava Shimadzu LCMS-8050 s triple quadrupolem a C18 kolona Kinetex (2,1×100 mm, 1,7 μm). Ionizace probíhala v režimu ESI pozitivním a detekci zajišťovalo režim MRM se dvěma přechody na každý analyt.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje lineárních kalibračních křivek s korelačním koeficientem r2>0,999 v rozsahu 10 pg/mL až 10 ng/mL. Mez detekce a kvantifikace se pohybuje pod 7,4 pg/mL a 22,4 pg/mL. Opakovatelnost (%RSD) je u většiny analytů pod 7,5 % při nižších koncentracích. Matrix effect se pohybuje kolem 72–81 % a výtěžky extrakce dosahují 65–95 %. Analýza reálných vzorků odhalila překročení limitu pro B1 ve vzorku UL.

Praktické přínosy a využití metody

• Rychlá a jednoduchá příprava vzorku pomocí QuEChERS.
• Nákladová efektivita oproti imunoafinitním technikám.
• Vysoká citlivost a spolehlivost detekce aflatoxinů.
• Vhodná pro rutinní monitorování kvality potravin a QA/QC.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření metody na jiné matrice (obiloviny, ořechy), integrace do automatizovaných preparativních systémů a aplikace v kombinaci s vysokorozlišovacími hmotnostními spektrometry pro vyšší selektivitu a multiplexní analýzy.

Závěr

Navržená LC/MS/MS metoda s QuEChERS přípravou vzorku nabízí vyvážené řešení vysoké citlivosti, přesnosti a provozní efektivity pro stanovení aflatoxinů v arašídovém másle. Výsledky potvrzují její vhodné využití pro regulovaný dohled nad potravinami.

Reference

• Pereira V.; Fernandes J.; Cunha S. Trends in Food Science & Technology 2014, 36, 96–136.
• Liu Y.; Han S.; Lu M.; Wang P.; Han J.; Wang J. Journal of Chromatography B 2014, 970, 68–76.