Reliable HPLC/UV Quantification of Nitrosamine Impurities in Valsartan and Ranitidine Drug Substances

Význam tématu

Carcinogenní nitrosaminy představují významné zdravotní riziko, protože mohou indukovat mutace DNA a vést k rakovině. Jejich přítomnost ve farmaceutických látkách, zejména valsartanu a ranitidinu, vedla k odvolání léčiv a zdůraznila potřebu spolehlivé a citlivé analytické metody pro kvantifikaci těchto nečistot.

Cíle a přehled studie

Tento článek představuje vývoj a validaci HPLC-UV metody pro současné stanovení šesti nitrosaminů: NDMA, NMBA, NDEA, NEIPA, NDIPA a NDBA v valsartanu a NDMA v ranitidinu. Studie hodnotí limity kvantifikace a linearitu metody v rozsahu 10–1000 ng/mL.

Použitá instrumentace

• HPLC systém ACQUITY Arc se 2998 PDA detektorem
• Mass detektor ACQUITY QDa pro potvrzení identity špiček
• Reverzní kolona XSelect HSS T3 (4,6 × 100 mm, 3,5 μm)

Použitá metodika

Analýza byla prováděna při 40 °C s mobilní fází voda (0,02 % formiové kyseliny) a acetonitril v gradientním eluci, průtokem 1,0 mL/min. Vzorky se připravily v poměru 80:20 voda/metanol se standardními roztoky nitrosaminů. Injekční objem byl 25 μL, detekce UV při 245 nm, rozsah m/z pro QDa 50–500, pozitivní ionizace ESI.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje LOQ 10 ng/mL pro NDMA, NDEA, NDIPA a 20 ng/mL pro NMBA, NEIPA, NDBA s poměrem signál/šum ≥10. Reprodukovatelnost měření (%RSD) špičkových ploch je ≤8,2 %. Lineární odezva v rozsahu 10–1000 ng/mL vykazuje koeficienty R2 ≥0,99978.

Přínosy a praktické využití metody

• Simultánní kvantifikace šesti nitrosaminů v jediné analýze
• Spolehlivá identifikace díky kombinaci UV měření a hmotnostní detekce
• Vhodné pro rutinní kontrolu kvality farmaceutických surovin

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metodiky na UHPLC-MS/MS pro vyšší citlivost, automatizace přípravy vzorků a integrace s pokročilými softwarovými nástroji pro rychlou validaci a reportování. Metoda lze adaptovat na další farmaceutické látky s podobnou chemickou povahou.

Závěr

Popsaná HPLC-UV metoda kombinovaná s QDa detektorem nabízí robustní a reprodukovatelnou strategii pro kvantifikaci nitrosaminových nečistot ve valsartanu a ranitidinu, dosahuje citlivosti až 10 ng/mL a splňuje požadavky farmaceutické kontroly kvality.

Reference

1. FDA Update on recent voluntary ARB drug recalls
2. FDA Statement: NDMA found in ranitidine samples
3. Maziarz M, Naughton S, Rainville P. Use of a Proprietary Polar Column Chemistry for the Separation of Nitrosamines in Sartan and Ranitidine Drug Substances. Waters Technology Brief. 720006738EN. December 2019.