Ultra-Sensitive and Rapid Assay of Neonicotinoids, Fipronil and Some Metabolites in Honey by UHPLC-MS/MS [LCMS-8060]

Význam tématu

Včely medonosné mají klíčovou roli v opylování zemědělských plodin. Neonicotinoidy a fipronil představují riziko pro zdraví včel a mohou přispívat k poruchám kolonií. Vysoce citlivé metody detekce reziduí pesticidů v medu pomáhají sledovat expozici těchto látek a hodnotit environmentální dopady.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo vyvinout rychlou a ultra-citlivou UHPLC-MS/MS metodu pro kvantifikaci neonicotinoidů, fipronilu a jejich metabolitů v medu. Studie demonstruje jednoduchou přípravu vzorku, optimalizaci chromatografie a validaci výkonu na reálných i kalibračních vzorcích.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci vzorku se uplatnil modifikovaný QuEChERS protokol s dispersní SPE krokem a interními standardy thiamethoxam-d3, imidacloprid-d4 a clothianidin-d3. Po homogenizaci medu a přidání acetonitrilu byla směs vysrážena, centrifugována a přečištěna na MgSO4, PSA a C18.

Použitá instrumentace

• UHPLC systém: Shimadzu Nexera X2
• Hmotnostní spektrometr: Shimadzu LCMS-8060, dvojitý QqQ, Heated ESI
• Kolona: ACE SuperC18 100×2,1 mm, 2 μm, 30 °C
• Mobilní fáze: voda a methanol, obě s 0,05 % amoniaku, gradient 5–100 % B během 3 min, průtok 0,6 ml/min
• MS/MS parametry: MRM tranzice pro 10 cílových sloučenin a 3 ISTD, polarita +/−, rozlišení unit uni

Hlavní výsledky a diskuse

• Obnovení (recovery) 70–120 % pro všechny analyty potvrzené podle EU SANTE/11945/2015.
• LOQ v rozsahu 0,001–0,020 μg/kg pro jednotlivé neonicotinoidy a fipronil.
• Systém umožnil detekovat reálné vzorky medu s koncentracemi významně pod povolenými limity.
• Analýza devíti komerčních medů odhalila přítomnost acetamipridu, imidaclopridu, thiamethoxamu a dalších metabolitů v rozmezí 0,005–1,7 μg/kg.
• Stabilita signálu zajištěná při 150 po sobě jdoucích injekcích, RSD 1–17 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda kombinuje rychlost (4min běh), jednoduchou přípravu vzorku a vysokou citlivost, což umožňuje regulační monitorování reziduí pesticidů v potravinářských vzorcích. Lze ji adaptovat na pyl a vzorky z těla včel pro komplexní ekologický monitoring.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu sledovaných pesticidů a jejich metabolitů.
• Automatizace přípravy vzorků pro vysokoprůchodnost (high-throughput).
• Integrace s datovými platformami pro environmentální sledování a predikci rizik.
• Uplatnění v dlouhodobých studiích biologické akumulace včelích produktů.

Závěr

Vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda pro ultra-citlivní detekci neonicotinoidů a fipronilu v medu splňuje přísné požadavky na obnovu, přesnost a stabilitu. Jednoduchá extrakce i rychlý analytický běh z ní činí efektivní nástroj pro vědecký výzkum i regulační kontrolu.

Reference

• EU SANTE/11945/2015: Doporučení pro validační hodnoty analytických metod v potravinách
• Shimadzu Application Note LAAN-A-LM-E111, First Edition Dec. 2016