Simultaneous analysis of multiple food allergen and its detection from processed food

Význam tématu

Potravinové alergie představují významný zdravotní problém s odhadovanou prevalencí až 10 procent. Přesné stanovení přítomnosti hlavních alergenů v potravinách, zejména po tepelné úpravě, je klíčové pro ochranu citlivých spotřebitelů a dodržení legislativních požadavků, jako je FALCPA. Tradiční metody ELISA se potýkají s omezeními v citlivosti a selektivitě, zatímco LC-MS/MS nabízí simultánní a vysoce selektivní detekci více alergenů.

Cíle a přehled studie / článku

Studie si klade za cíl vyvinout a validovat LC-MS/MS metodu schopnou monitorovat třináct klíčových alergenů vyžadovaných americkým úřadem FDA, včetně mléka, vajec, ryb, korýšů, ořechů, pšenice a sóji. Metoda zahrnuje výběr specifických peptidových markerů a optimalizaci MRM přechodů pro aplikaci na syrové i tepelně zpracované potraviny.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky byly mleté, odmaštěné hexanem, extrahovány v pufru s Tris-HCl a ureou, redukovány, alkylovány a digesovány trypsinem. Peptidy byly desalinizovány SPE a analyzovány UHPLC-MS/MS.

• UHPLC: Shimadzu Nexera X2, kolona Shim-pack XR-ODS III
• Mass spektrometr: Shimadzu LCMS-8050, režim MRM
• Mobilní fáze: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě a acetonitril

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda identifikovala a kvantifikovala 245 MRM přechodů pro třináct alergenů. Kalibrační křivky vykázaly lineární oblasti 3,9 až 250 mg/kg s korelační koeficienty R2 nad 0,995. Ve všech testovaných tepelně zpracovaných vzorcích (chléb, sušenky, smažená ryba, mražená těstovina) byly vybrané peptidy úspěšně detekovány. Diskuse zdůraznila důležitost referenčních materiálů ke kompenzaci efektu matric, extrakční a proteolytické účinnosti.

Přínosy a praktické využití metody

Nově navržená metoda umožňuje simultánní a spolehlivou detekci více potravinových alergenů ve složitých matricích. Díky vysoké selektivitě a citlivosti nachází uplatnění v kontrolních laboratořích potravinářského průmyslu, při QA/QC procesech a v rámci legislativních auditů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávaným směrem je rozšíření počtu sledovaných alergenů a integrace izotopově značených standardů pro kvantitativní analýzy. Další rozvoj zahrnuje automatizaci přípravy vzorků a využití vysoce výkonných hmotnostních analyzátorů s vyšším počtem paralelních přechodů.

Závěr

Předložená LC-MS/MS metoda pro simultánní detekci třinácti hlavních potravinových alergenů prokázala vysokou selektivitu, citlivost a spolehlivost v surových i tepelně zpracovaných potravinách. Implementace této metody přispívá k ochraně spotřebitelů a plnění legislativních požadavků.

Reference

Ogura T, Fujito Y, Matsubara T, Hirano I, Kuhn E. Simultaneous analysis of multiple food allergen and its detection from processed food. Shimadzu Corporation; Shimadzu USA