Automated Hydrolysis, Extraction and Analysis of Synthetic Cathinones in Urine using a Robotic Autosampler and LC-MS/MS Platform

Význam tématu

Společenská poptávka po rychlém a spolehlivém stanovení syntetických cathinonů v moči roste v souvislosti s narůstajícím užíváním těchto psychoaktivních látek.
Forenzní a klinické laboratoře vyžadují vysoce výkonné a reprodukovatelné postupy, které minimalizují manuální zásahy a zkracují dobu analýzy.

Cíle a přehled studie

Článek popisuje plně automatizovaný postup enzymatické hydrolýzy, dispersivní SPE extrakce a následné analýzy syntetických cathinonů v moči pomocí LC-MS/MS.
Hlavní cíle:

• Automatizace enzymatické hydrolýzy β-glukuronidázou
• Dispersivní SPE s využitím DPX technologie
• Rychlá a citlivá detekce na Triple Quadrupole MS

Použitá metodika a instrumentace

Enzymatická hydrolýza proběhla s použitím recombinantní β-glukuronidázy B-One při pokojové teplotě po dobu 15 minut.
Extrahované vzorky byly zpracovány DPX postupem v GERSTEL MPS roboticPRO.
Analytická část zahrnovala Agilent 1260 HPLC s kolonnou Poroshell 120 EC-C18 (3,0×50 mm, 2,7 µm) a Agilent Ultivo Triple Quadrupole MS s Jet stream ESI.
Objem injekce: 2 µL, teplota kolony: 60 °C.

Hlavní výsledky a diskuse

Optimalizace hydrolýzy prokázala úplnou dekonjugaci morfinu po 15 minutách.
Metoda dosahuje lineární kalibrace s korelačním koeficientem R2 ≥ 0,99.
Mezní kvantitativní úroveň činí 2,5 ng/mL.
Průměrná přesnost 99,4 %, průměrná preciznost 6,04 % CV.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká průchodnost analýz (high throughput)
• Snížení manuálních kroků a rizika kontaminace
• Vhodné pro forenzní toxikologii i klinický monitoring

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření automatizovaných postupů na další nově psychoaktivní látky a kombinované protokoly.
Integrace pokročilých datových platforem pro zrychlení vyhodnocení výsledků.
Miniaturizace a snížení spotřeby reagencií pro udržitelnější provoz.

Závěr

Implementace plně automatizované hydrolýzy, SPE a LC-MS/MS významně zrychluje a zkvalitňuje stanovení syntetických cathinonů v moči s vysokou přesností a precizností.

Reference

1. Technical Data Sheet B-One, Kura Biotech Inc., Retrieved January 2020