Quantitative determination of seven synthetic cathinones (stimulants) from stabilized human urine by UHPLC-MS/MS for forensic toxicology

Význam tématu

Rychlý nárůst syntetických cathinonů („bath salts“) klade vysoké nároky na citlivé a spolehlivé metody detekce v biologických matricích. Jejich psychoaktivní účinky a legální šedé zóny vyžadují robustní analytické nástroje pro forenzní toxikologii a monitorování zneužívání.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout a validovat kvantitativní UHPLC-MS/MS metodu pro stanovení sedmi syntetických cathinonů v ředěné kyselou lidské moči. Metoda kombinuje pevnou fázi SOLA SCX SPE a hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) k odstranění matricových efektů a dosažení vysoké citlivosti bez derivatizace.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorku: 100 µl kyselé moči (1 M askorbát) s přidaným vnitřním standardem, SPE na SOLA SCX 10 mg/96|well, promytí kyselinou fosforečnou a metanolem, eluace amoniakem v acetonitrilu, odpaření, rekonstituce v acetonitrilu.
• Chromatografie: Syncronis HILIC 1.7 µm, 100×2.1 mm, izokratická separace AcCN/10 mM NH4-formiát (95/5, v/v), 0.5 ml/min, 30 °C, doba analýzy 6 min, injekce 1 µl.
• MS/MS: TSQ Quantiva triple-quad s HESI-II, pozitivní ionizace, optimalizované tranzice pro každý analyz.
• Software: Chromeleon CDS 7.2.9 pro akvizici a kvantifikaci.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala lineární kalibraci v rozsahu 0.100–100 ng/ml (1/x² vážená), LLOQ 0.100 ng/ml, intra-denní bias <10 % a CV <8 % na čtyřech úrovních QC. Recoveries se pohybovaly mezi 85.9 % a 94.1 %. Normalizovaný matricový faktor 0.897–1.01 (CV ≤9.5 %) potvrdil eliminaci iontového tlumení. Nebylo zaznamenáno carry-over ani interferencí v šestici individuálních blanků.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká citlivost a specificity bez nutnosti derivatizace.
• Rychlý analytický cyklus 6 minut umožňuje vysokou propustnost.
• Robustní a automatizovatelná příprava vzorku se SOLA SCX SPE.
• Minimální matricové efekty díky kombinaci mixed-mode SPE a HILIC.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu na nové psychoaktivní látky a jejich metabolity.
• Integrace do plně automatizovaných forenzních a klinických pracovních postupů.
• Adaptace pro screening populací a monitoring léčebné compliance.
• Vývoj multiplexních metod pro rychlé a širokospektré analýzy.

Závěr

Popsaná UHPLC-MS/MS metoda nabízí citlivé, rychlé a spolehlivé stanovení sedmi syntetických cathinonů v lidské moči bez derivatizace. Vysoká obnova, minimální matricové efekty a krátký čas analýzy ji předurčují pro forenzní toxikologii a rozsáhlé laboratorní provozy.

Reference

• Technická poznámka Thermo Scientific TN21965 (2019)