Determination of Nitrosamine impurities in Losartan Potassium drug substance using Triple Quadrupole Liquid Chromatography Mass Spectrometry

Význam tématu

Analýza nitrosaminových nečistot v léčivu losartan draselný má klíčový význam z hlediska bezpečnosti pacientů, jelikož nitrosaminy jsou pravděpodobné karcinogeny vznikající jako vedlejší produkty výroby. Regulátoři (FDA, EMA) stanovují přísné limity a vyžadují citlivé a reprodukovatelné metody schopné detekovat tyto látky na úrovni ng/mL.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a validovat metodiku pro současné stanovení šesti nitrosaminových nečistot (NDMA, NDEA, NMBA, NEIPA, NDIPA, NDBA) v losartanu draselném pomocí triple kvadrupólového LC/MS při velmi nízkých detekčních limitech.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorku: 100 mg API, rozmíchání v 5 mL diluentu, extrakce na třepačce, odstředění, filtrace 0,2 µm a injekce 20 µL.
• Chromatografie: Agilent 1290 Infinity II LC (pumpa, autosampler 6 °C), kolona Zorbax Eclipse Plus Phenyl-Hexyl 2,1×100 mm, 1,8 µm při 40 °C, mobilní fáze A (0,2 % formové kyseliny ve vodě), B (methanol), gradient 0–25 min s průtokem 0,25–0,40 mL/min.
• Detekce: Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS s APCI zdrojem v pozitivním režimu, dynamický MRM pro každou složku nitrosaminů.

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineárnost: NDMA, NMBA, NDEA (0,05–25 ng/mL) a NEIPA, NDIPA, NDBA (0,1–25 ng/mL) s korelačním koeficientem r2 > 0,997.
• Reprodukovatelnost: RSD plochy < 6 % při 1 ng/mL (8 replikát, včetně bracketing standardů).
• Recovery: 91–113 % při spikovaných úrovních 1–2 ng/mL.
• Separace: Losartan je efektivně odváděn do odpadu diverterem, což chrání MS před kontaminací vysokou koncentrací API.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý a citlivý screening nitrosaminů v API losartan draselný v souladu s požadavky regulačních agentur.
• Jednoduchá příprava vzorku a robustní reprodukovatelnost vhodná pro rutinní QA/QC laboratoře.
• Minimalizace rizika kontaminace hmotnostního spektrometru díky diverzi špičky API.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další sartany a farmaceutická API citlivá na nitrosaminy.
• Integrace s vysokopropustnými platformami pro monitorování v reálném čase.
• Optimalizace pro detekci dalších genotoxických nečistot a aplikace v environmentální analýze.

Závěr

Triple kvadrupólová LC/MS metoda s APCI zdrojem poskytuje spolehlivé, reprodukovatelné a citlivé stanovení šesti nitrosaminových nečistot v losartan draselném. Metoda splňuje přísné limity regulačních předpisů a je připravena pro rutinní nasazení v QA/QC laboratořích.