The Detection and Analytical Confirmation of Synthetic Fentanyl Analogues in Human Urine & Serum using an UltivoLC/TQ

Význam tématu

Detekce a kvantifikace syntetických fentanylových opioidů je klíčová pro toxikologické i forenzní laboratoře vzhledem k rostoucímu zneužívání těchto účinných látek a jejich analogů. Rychlá, citlivá a spolehlivá metoda umožňuje včasné odhalení intoxikací či nelegálních syntéz.

Cíle a přehled studie / článku

Studie byla zaměřena na vývoj cílené LC–MS/MS metody pro stanovení 12 syntetických fentanylových analoga, prekurzoru 4-ANPP a analogu W-18 v lidské plazmě a moči. Hlavním cílem bylo stanovit dolní limity kvantifikace (LLOQ), lineárnost, přesnost, preciznost a robustnost metody.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II UHPLC spojený s Ultivo triple quadrupole LC/TQ
• Ionizace: elektrosprejová (ESI) v pozitivním režimu
• Kolona: Poroshell EC-C18 (2,1 × 50 mm, 2,7 µm)

Metodika

Pro extrakci ze vzorků plazmy byl použit protokol s precipitací bílkovin acetonitrilem obsahujícím deuterovaný interní standard, poté ředění poměrem 1:2 methanol/voda. Moč byla po přidání interního standardu odstředěna a naředěna vodou 1:10. Mobilní fáze A tvořila voda s 0,01 % kyseliny mravenčí a 5 mM amonného formiátu, fáze B methanol s 0,01 % kyseliny mravenčí. Gradient trval 7 minut, objem injekce 5 µL. Každá látka byla sledována pomocí dvou MRM přechodů.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda pro plazmu dosáhla LLOQ od 10 pg/ml do 50 pg/ml, pro moč od 50 pg/ml do 100 pg/ml. Lineární rozsahy pokrývaly 10 pg/ml až 500 ng/ml se součinitelem lineárnosti R2 > 0,997 (plazma) a > 0,996 (moč). Preciznost (%RSD) byla < 7 % v plazmě a < 9 % v moči napříč kalibračními úrovněmi. Chromatografická separace byla dosažena v gradientu stoupajícím od 15 % do 95 % fáze B.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou citlivost a krátký analytický cyklus (7 min) vhodný pro rutinní toxikologické i forenzní analýzy. Umožňuje spolehlivé stanovení širokého spektra fentanylových analogů ve dvou biologických matricích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat rozšíření panelu sledovaných syntetik včetně nově objevených analogů a zdokonalení přípravy vzorků za účelem potlačení maticových interferencí. Integrace metody do vysokokapacitních screeningových platforem je dalším krokem.

Závěr

Vyvinutá LC–MS/MS metoda na bázi Agilent Ultivo LC/TQ pro analýzu syntetických fentanylových opioidů v lidské plazmě a moči prokázala vynikající citlivost, preciznost a lineárnost. Rychlost a robustnost techniky ji předurčují pro rutinní toxikologické aplikace.

Reference

Stone PJW. The Detection and Analytical Confirmation of Synthetic Fentanyl Analogues in Human Urine & Serum using an Ultivo LC/TQ. MSACL 2018; Agilent Technologies, Inc.