LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceAgilent Technologies
Význam tématu
Biogenní aminy se vyskytují ve fermentovaných potravinách a mohou signalizovat mikrobiální kontaminaci či nevhodné skladování. Vysoká koncentrace histaminu a tyraminu představuje zdravotní riziko. Přesná a spolehlivá analýza těchto látek je nezbytná pro zajištění bezpečnosti potravin, minimalizaci zdravotních rizik a splnění legislativních požadavků.
Cíle a přehled studie
- Ukázat proveditelnost přímé analýzy biogenních aminů ve víně bez chemické derivatizace.
- Demonstrovat využití Agilent 1290 Infinity II LC a Ultivo LC/TQ/MS pro citlivé, selektivní a rychlé stanovení.
- Vyhodnotit výkonové parametry metody, vč. linearity, mezí detekce, přesnosti a maticových efektů.
Použitá metodika a instrumentace
- Kapalná chromatografie: Agilent 1290 Infinity II s flexibilní pumpou, vzorkovačem s 40 µL hlavou a multicolumn termostatem.
- Chromatografická kolona: InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (2.1 × 50 mm, 2.7 µm).
- Iontová párná chromatografie s heptafluorbutyrovou kyselinou pro zlepšení retence a oddělení aminů.
- Hmotnostní spektrometrie: Agilent Ultivo LC/TQ s iontovým zdrojem Jet Stream v režimu pozitivní ionizace a dynamic MRM.
- Software: Agilent MassHunter Workstation (data acquisice, optimalizace ESI parametrů a kvantifikace).
Hlavní výsledky a diskuse
- Oddělení 15 biogenních aminů během 7 min s gradientem 2–30 % organické fáze umožňuje nízkou spotřebu rozpouštědel.
- Linearity kalibračních křivek R² ≥ 0.984, meze detekce v rozmezí 0.5–2 ng/mL.
- Přesnost area < 1 %, opakovatelnost retence < 0.24 % pro většinu sloučenin.
- V červeném víně Tempranillo jsou maticové efekty nízké (< 15 %), výjimkou je agmatin a norepinefrin s potlačením signálu okolo 50 %.
- Nejvyšší koncentrace zjištěné ve vzorku: putrescin 11.8 mg/L, histamin 2.5 mg/L, tyramin 2.06 mg/L, pod toxickými práhy EFSA.
Přínosy a praktické využití metody
- Zrušení derivatizace zkracuje dobu přípravy vzorku a snižuje náklady.
- Nízký tlak (< 400 bar) umožňuje použití základních LC systémů.
- Vysoká propustnost a automatizace vhodná pro rutinní kontroly kvality ve vinařstvích i potravinářských laboratořích.
Budoucí trendy a možnosti využití
Zlepšení přípravy vzorků a aplikace stabilně označených standardů sníží maticové efekty a zvýší přesnost. Metoda je rozšiřitelná na další potravinářské matice, jako jsou sýry nebo uzeniny. Integrace s vysoce výkonnými LC systémy a pokročilou MS detekcí podpoří širší využití pro legislativní monitoring.
Závěr
Přímá LC–MS/MS metoda s Agilent 1290 Infinity II a Ultivo LC/TQ poskytuje rychlou, citlivou a reprodukovatelnou analýzu biogenních aminů ve víně. Splňuje požadavky na linearitu, detekční limity i přesnost a je vhodná pro rutinní i výzkumné aplikace v potravinářské analytice.
Reference
- Scientific Opinion on Risk Based Control of Biogenic Amine Formation in Fermented Foods. EFSA Journal 2011, 9(10), 2393.
- Sentellas S; Núñez O; Saurina J. Recent Advances in the Determination of Biogenic Amines in Food Samples by (U)HPLC. J Agric Food Chem 2016, 64(41), 7667–7678.
- Kaufmann A; Maden K. Easy and Fast Method for the Determination of Biogenic Amines in Fish and Fish Products with Liquid Chromatography Coupled to Orbitrap Tandem Mass Spectrometry. J AOAC Int 2018, 101(2), 336–341.
- Häkkinen MR. Polyamine Analysis by LC-MS. Methods Mol Biol 2011, 720, 505–518.
- Landete JM et al. Biogenic Amines in Wines from Three Spanish Regions. J Agric Food Chem 2005, 53(4), 1119–1124.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
