A Simple Method to Analyze Barbiturates in Urine Using a Triple Quadrupole Mass Spectrometer

Význam tématu

Barbituráty představují důležitou skupinu psychoaktivních látek sledovanou ve forenzní toxikologii a klinickém sledování. Rychlá a citlivá analýza jejich stopových koncentrací v moči je klíčová pro přesné stanovení expozice a dodržení laboratorních norem.

Cíle a přehled studie

Práce se zaměřila na vývoj jednoduché a robustní kvantitativní metody pro stanovení pěti barbiturátů (amobarbital, butalbital, pentobarbital, phenobarbital, secobarbital) v moči využívající techniku LC-MS/MS se zařízením TSQ Endura.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky byly připraveny přímým ředěním 50 µl moči do 950 µl vody s interními standardy (100 ng/ml). Separace probíhala na UHPLC Thermo Scientific UltiMate 3000 s kolonkou Accucore C18 2,6 µm 50×2,1 mm pomocí gradientu 5 mM acetátu amonného a acetonitrilu. Detekce se prováděla na triple kvadrupólovém spektrometru TSQ Endura s HESI II v režimu SRM, kdy pro každý analyzát byly sledovány dva přechody pro kvantifikaci a potvrzení.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla kvantifikačních limitů 5 ng/ml pro butalbital a secobarbital, 10 ng/ml pro amobarbital a pentobarbital a 25 ng/ml pro phenobarbital. Linearita byla potvrzena v rozsahu 5 až 2000 ng/ml s přesností a správností lepší než 15 %. Intraassay i interassay přesnost vykazovala RSD pod 10 %. Matriční vlivy byly minimální, relativní recovery po korekci interními standardy mezi 85 a 115 %. Rozlišení izobarických amobarbitalu a pentobarbitalu bylo uspokojivé pro rutinní analýzu.

Přínosy a praktické využití metody

Strategie přímého ředění vzorků je časově úsporná, ekonomická a snadno implementovatelná v rutinních forenzních či klinických laboratořích. Robustní výkon a nízké matriční vlivy zajišťují spolehlivou detekci i v heterogenních biologických matricích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda se dá rozšířit o další psychoaktivní látky a jejich metabolity či adaptovat na vysokoprůchodové platformy. Další automatizace přípravy vzorků a pokročilé datové zpracování mohou zvýšit efektivitu a objem analýz.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda nabízí rychlý, citlivý a validovaný přístup pro kvantifikaci barbiturátů v moči, splňující požadavky forenzní toxikologie. Díky jednoduché přípravě a vysoké spolehlivosti je vhodná pro rutinní aplikace.

Reference

Xie X; Gao M; Kozak M A Simple Method to Analyze Barbiturates in Urine Using a Triple Quadrupole Mass Spectrometer Application Note 640 Thermo Fisher Scientific 2016