An End-To-End Workflow for Quantitative Screening of Multiclass, Multiresidue Veterinary Drugs in Meat Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS

Význam tématu

Měření reziduí veterinárních léčiv v mase je klíčové pro ochranu veřejného zdraví a splnění přísných regulačních limitů stanovených mezinárodními organizacemi. Rutinní laboratorní testování vyžaduje rychlé, citlivé a reprodukovatelné metody pro detekci stovek potenciálních látek ve složitých matricích masa.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo vyvinout a ověřit end-to-end workflow pro kvantitativní screening a detekci 210 multiklasových reziduí veterinárních léčiv v kuřecím, vepřovém a hovězím mase. Metoda zahrnuje vzorkování, přípravu vzorku, chromatografickou separaci, hmotnostní spektrometrii a zpracování dat v jednom integrovaném postupu.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorku: homogenizace 2 g masa, duální extrakce vodným pufrem a organickou fází
• Čištění: Agilent Captiva EMR–Lipid SPE a pozitivní tlakový manifold PPM-48
• Chromatografie: Agilent 1290 Infinity II LC s Poroshell 120 EC-C18, gradientní eluce za 13 minut při 0,5 mL/min
• Detekce: Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS v režimu dynamic MRM s Agilent Jet Stream ion source
• Software: MassHunter Quantitative Analysis pro akvizici a zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla limitů detekce pod 5 ng/mL pro většinu analyzovaných látek, kalibrační křivky byly lineární při R2 > 0,99. Přesnost se pohybovala v rozmezí 73–113 % a intraday RSD bylo menší než 19 %. Recoveries 60–120 % pro více než 97 % látek prokázaly vysokou reprodukovatelnost napříč třemi matricemi. Matricové efekty byly vyhodnoceny a potlačeny použitím kalibrace v matrici.

Přínosy a praktické využití metody

• Zrychlení a zjednodušení rutinního screeningu veterinárních reziduí
• Univerzální workflow pro různé druhy masa s minimálním počtem separátních metod
• Splnění požadavků mezinárodních předpisů (AOAC, EU, US FDA, FSIS)

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další zvyšování senzitivity a robustness triple kvadrupolárních MS systémů
• Rozšíření metodiky na další potravinové matrice (mléko, vejce, mořské plody)
• Automatizace přípravy vzorků a integrace s laboratoř–informačními systémy (LIMS)
• Využití pokročilých algoritmů a umělé inteligence pro prediktivní screening a rychlejší vyhodnocení dat

Závěr

Navržené end-to-end workflow pro multiklasový screening 210 veterinárních léčiv v mase nabízí vysokou citlivost, přesnost a reprodukovatelnost. Metoda je rychlá, efektivní a plně kompatibilní s požadavky mezinárodních regulací, což ji předurčuje k rutinnímu použití v potravinářských a kontrolních laboratořích.

Reference

1. Guidelines for Standard Method Performance Requirements, AOAC Official Methods of Analysis, Appendix F, 2016.
2. Code of Federal Regulations Title 21 Part 556, US FDA, 2019.
3. US FSIS list of chemical contaminants, 2017.
4. Commission Regulation (EU) No 37/2010 on pharmacologically active substances and MRLs.
5. AOAC Screening and Identification Method for Regulated Veterinary Drug Residues in Food, Version 7, 2018.