A Simple LC-MS/MS Method for Simultaneous Analysis of 35 Anti-psychotics in Human Plasma for Clinical Research

Význam tématu

Analýza antipsychotik v lidské plazmě je nezbytná pro sledování farmakokinetiky, identifikaci lékových interakcí a optimalizaci terapeutických režimů. Vzhledem k častému používání kombinovaných terapií je potřeba spolehlivých a citlivých metod umožňujících kvantifikaci více látek současně.

Cíle a přehled studie

• Vyvinout jednoduchou, rychlou a nákladově efektivní LC-MS/MS metodu pro simultánní kvantifikaci 35 antipsychotik z 50 µl lidské plazmy.
• Zkrátit dobu analýzy na necelých 5 minut při zachování vysoké přesnosti a citlivosti.

Použitá metodika

• Vzorky: 50 µl plazmy, proteoprecipitace MeOH:0,1 M ZnSO₄ (70:30, v/v) s interními standardy.
• Odstředění 18 000 g, 5 min, transfer supernatantu, ředění vodou v 96-well destičce.
• Chromatografie: gradient vody a methanolu s 2 mM acetátem amonným/0,1 % kyselinou mravenčí, tok 0,6 ml/min, doba běhu 4,3 min.
• Detekce: pozitivní ESI, MRM režim.

Použitá instrumentace

• ACQUITY UPLC I-Class System s FL Sample Manager.
• Kolona XSelect HSS C18 SB XP 2.1×30 mm, 2.5 µm, 100 Å.
• Mass spektrometr Xevo TQ-S micro (Waters) v režimu MRM.

Hlavní výsledky a diskuse

• Linearita kalibrace: r² > 0,99 pro všechny analyty.
• Senzitivita: LLMI (≤20 % CV, ≤15 % bias) dosažena na nejnižším kalibrátoru.
• Carryover: méně než 25 % plošného signálu Kalibrátoru 1, bez významných přenosů.
• Matrixové efekty: normalizované faktory 0,88–1,14, interní standardy kompenzují potlačení či zvýšení signálu.
• Rekuperace: 85–115 % při nízkých i vysokých QC, extrakční účinnost 52,2–96,9 %.
• Preciznost: celková CV ≤ 8,7 % pro všechny koncentrace a analyty.
• Interference: endogenní látky (albumin, bilirubin, kreatinin, lipidy, kyselina močová) neovlivnily kvantifikaci.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá analýza 35 antipsychotik v jediné injekci za 4,3 min.
• Minimální objem vzorku (50 µl) a jednoduchá příprava bez složité extrakce.
• Vysoká robustnost, reprodukovatelnost a nízké náklady na spotřební materiál.
• Ideální pro klinické výzkumné studie, terapeutický monitoring a studium lékových interakcí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze dále rozšířit o další psychoaktivní látky, adaptovat na automatizované vysokopropustné platformy a integrovat s on-line vzorkovacími systémy. Potenciál nabízí také využití umělé inteligence pro optimalizaci analýzy a rychlou interpretaci dat v reálném čase pro personalizovanou medicínu.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda poskytuje rychlou, citlivou a spolehlivou kvantifikaci 35 antipsychotik v lidské plazmě, přičemž splňuje požadavky klinického výzkumu na přesnost, robustnost a nízký objem vzorku.