Mitigation of Non-Specific Adsorption of Propionic Acid and Acetic Acid NSAID Derivatives with MaxPeak™ Premier Columns with Inert Hardware

Význam tématu

Analýza nesteroidních protizánětlivých látek (NSAIDs) je klíčová pro farmaceutický výzkum, kontrolu kvality i klinické studie. Mnohé NSAIDs obsahují karboxylové skupiny, které mohou tvořit nespecifické komplexy s kovovými povrchy chromatografických komponent. Tyto interakce vedou k nižší citlivosti, nesymetrickým tvarům píků a ztrátám analytů. Implementace inertního hardwaru v kapalinové chromatografii (HPLC) proto umožňuje zlepšit reprodukovatelnost a efektivitu analýzy kyselých molekul.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace bylo porovnat chromatografické chování čtyř reprezentativních NSAIDs (naproxen, fenoprofen, ibuprofen, diklofenak) na kolonách CORTECS Premier C18 s inertním MaxPeak HPS povrchem a na běžných 5µm solid-core C18 kolonách od dvou dalších dodavatelů i na standardním nerezovém provedení téže koreční fáze. Studie sledovala rozlišení kritických párů, tvar píků, šířku a výšku píků.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu směsi standardů byly jednotlivé NSAIDs rozpuštěny v methanolu do koncentrace 50 µg/ml, u ibuprofenu zvýšena na 500 µg/ml pro dostatečnou UV citlivost při 270 nm. Chromatografické separace probíhaly na:

• CORTECS Premier C18, 4,6 × 50 mm, 5 µm s inertním MaxPeak High Performance Surfaces (HPS) hardwarem
• Základní CORTECS C18 ve standardním nerezovém provedení
• Dvě solid-core C18 kolony od jiných výrobců (5 µm)

Detekce: UV při 270 nm, mobilní fáze a gradient dle interních postupů Waters Corporation.

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnání chromatogramů ukázalo, že CORTECS Premier C18 s HPS inertním povrchem dosáhla nejlepšího rozlišení kritického páru ibuprofen–diklofenak (USP rozlišení 2,0) oproti 1,9 u konkurenční kolony. Tvar píků ibuprofenu vykázal tailing factor 1,0 (oproti 1,1 u dodavatele H). V porovnání s nerezovým provedením téže fáze došlo ke snížení šířky píků o 15 % a zvýšení výšky píků o 9–10 %, přičemž tailing klesl o 13 % (z 1,17 na 1,02). Tyto zlepšení indikují potlačení nespecifické adsorpce kyselých NSAIDs na kovových površích.

Přínosy a praktické využití metody

Inertní hardware MaxPeak HPS umožňuje:

• Vyšší citlivost díky menším ztrátám analytů
• Symetričtější pík a lepší rozlišení, zejména u kritických párů
• Snížení doby a nákladů na systematické pasivace kovových ploch
• Širší aplikovatelnost pro analýzu kyselých malých molekul

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj by mohl zahrnovat rozšíření inertních povrchů na systémy s ultra-vysokým tlakem (UHPLC) a kombinaci s novými sorpčními materiály pro zlepšení analýzy dalších skupin kovově citlivých látek (peptidy, metabolity). Inertní modifikace hardwaru by mohla najít uplatnění i v biotechnologické a environmentální analytice.

Závěr

MaxPeak Premier C18 kolony s inertním HPS hardwarem významně potlačily nespecifickou adsorpci propionových a octových derivátů NSAIDs, vedly ke zlepšení tvaru píků, rozlišení a citlivosti. Tyto výhody podporují jejich využití v rutinní farmaceutické analýze i výzkumu složitějších malých molekul.

Reference

1. Ghlichloo I, Gerriets V. Nonsteroidal Anti-Inflammatory Drugs (NSAIDs). StatPearls Publishing; 2024.
2. Layton CE, Rainville PD. Advantages of using MaxPeak HPS Technology for the Analysis of Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs. Waters Application Note. 720007531; 2022.
3. Clements BR, Rainville PD. Improved Chromatographic Analysis of NSAIDs Using CORTECS Premier Columns with MaxPeak HPS Technology. Waters Application Note. 720007751; 2023.
4. Neue UD. HPLC Columns: Theory, Technology, and Practice. Wiley-VCH; 1997.