Analysis of N-Nitroso-Sertraline in Drug Substance and Tablet Using LC-MS/MS

Význam tématu

n-nitrosaminy představují silné karcinogeny, které se mohou vznikat jako nechtěné nečistoty nebo produkty degradace ve farmaceutických výrobcích. Jejich přítomnost i v stopových množstvích ohrožuje bezpečnost pacientů a vyžaduje důsledné sledování a regulaci podle pokynů FDA a EMA.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo vyvinout a validovat vysoce citlivou metodu pro kvantifikaci N-nitroso-sertralinu v lékové látce a tabletách sertralinu pomocí UPLC–MS/MS. Studie zahrnovala analýzu standardů, látky a finálního přípravku, včetně spikovaných vzorků a testu robustnosti.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografie: UPLC I-Class FTN se sekcí kolony Atlantis™ Premier BEH C18 AX 2.1×100 mm, 2.5 µm.
• Detekce: tandemový kvadrupól Xevo™ TQ-S micro s elektrosprejovou ionizací v pozitivním módu.
• Databáze Quanpedia: výchozí nastavení MRM přechodů pro nitrosaminy.
• Příprava vzorků: metanolová extrakce, spiky standardů, tabletová matrix, centrifugace a filtrace.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla chromatografického rozlišení sertralinu (RT ~3,3 min) a N-nitroso-sertralinu (RT ~6,8 min). LOQ bylo stanoveno na 0,25 ppb (S/N >10) a lineární rozsah 0,25–100 ppb s R² > 0,99. Obnova se pohybovala mezi 85–93 % s RSD < 20 %. Nebyl pozorován žádný carryover. Kvantifikace ve vzorcích tablet prokázala průměrnou koncentraci 0,49 µg/kg (RSD < 12 %). Robustnost metody potvrdilo 360 kontinuálních injekcí s fluktuací oblasti < 9 %, přičemž bylo identifikováno in-vial nitrosování při delší době analýzy.

Přínosy a praktické využití metody

• Detekce stopových množství N-nitroso-sertralinu pod regulačním prahem FDA (0,5 ppm) a EMA.
• Rychlý vývoj metody díky databázi Quanpedia.
• Komplexní workflow od standardů až po finální přípravek.
• Vysoká přesnost, lineárnost a robustnost vhodná pro QC laboratoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další N-nitrosaminové nečistoty (NDSRI) ve farmaceutikách.
• Implementace antioxidačních činidel (např. kyselina askorbová) k potlačení in-vial nitrosací.
• Další optimalizace MRM přechodů a automatizace analýzy pomocí pokročilých softwarových nástrojů.
• Integrace do standardních QC procesů a rozšíření databáze Quanpedia o nové sloučeniny.

Závěr

Vyvinutá UPLC–MS/MS metoda pro stanovení N-nitroso-sertralinu prokázala splnění přísných požadavků FDA i EMA. Metoda nabízí vynikající citlivost, přesnost a robustnost a představuje kompletní workflow pro kontrolu genotoxických nečistot v substancích i finálních formách.

Reference

• FDA. Nitrosamine Impurities in Human Drugs; 2019.
• FDA. Updates and Press Announcements on ARB Recalls: Valsartan, Losartan a Irbesartan; 2020.
• Cioc R. C. a kol. Formation of N-Nitrosamine Drug Substance Related Impurities in Medicines: A Regulatory Perspective on Risk Factors and Mitigation Strategies.
• EMA. Q&A: Nitrosamine impurities; 2020.
• FDA. Updated Information: Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities; 2023.
• Burns M. J. a kol. Revisiting the Landscape of Potential Small and Drug Substance Related Nitrosamines in Pharmaceuticals. Journal of Pharmaceutical Sciences, 2023.