FlipLCTM. A New Method for Measuring Charged Analytes in Complex Mixtures. Part III.

Význam tématu

Askorbová kyselina (vitamin C) je zásadní nutrient i antioxidant v potravinách, doplňcích stravy a biologických vzorcích. Její přesné stanovení v komplexních matricích je důležité pro kontrolu kvality, výživu a zdravotní výzkum. Metody, které minimalizují vzájemné rušení látek a prodlužují životnost chromatografických kolonek, mají v praxi značný přínos.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem článku je představit novou chromatografickou metodu FlipLC™ určenou ke stanovení askorbové kyseliny v různých komplexních matricích bez nutnosti složité předúpravy. Autoři demonstrují, jak díky přepínání průtoku mezi analytickou a izolační kolonou lze dosáhnout rychlé, reprodukovatelné a čisté separace.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda FlipLC™ spočívá v paralelním zapojení dvou smíšeně modálních kolon:

• Analytická kolona Primesep B (4,6 × 150 mm)
• Izolační (flip) kolona Primesep 100 (4,6 × 50 mm)

Parametry separace:

• Mobilní fáze – isokratický režim
• Průtok – 1,0 mL/min
• Přepínací ventil – 0,5 min po nástřiku
• Detekce – UV při 270 nm
• Objem injekce – 5 µL filtrovaného vzorku

Smíšeně modální kolony kombinují reverzní fázi a iontovou výměnu, což umožňuje efektivní zadržení i smytí interferujících látek.

Hlavní výsledky a diskuse

Při analýze čerstvého jahodového džusu standardní jednosloupcovou metodou se špička askorbové kyseliny překrývala s interferencemi. Aplikací FlipLC™ došlo k výraznému zjednodušení chromatogramu a jasné separaci C-špičky. Celková doba analýzy klesla pod 5 minut a kolona zůstala chráněná před nekontrolovanými kontaminanty. Autoři rovněž stanovili koncentrace askorbové kyseliny v širokém spektru rostlinných vzorků s vysokou opakovatelností.

Přínosy a praktické využití metody

FlipLC™ přináší následující výhody:

• Eliminace rozsáhlých předúprav vzorku
• Rychlá analýza (<5 min) v isokratickém režimu
• Prodloužená životnost analytické kolony díky ochraně izolační kolony
• Omezení rušení interferujícími látkami v komplexních matricích

Metoda je vhodná pro potravinářské laboratoře, průmyslovou kontrolu kvality a biologické testy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření FlipLC™ na další nabité analytické cíle, automatizaci provozu a kombinaci s hmotnostní detekcí (LC-MS). Vývoj zelených mobilních fází a miniaturizace systému může zvýšit udržitelnost a propustnost analýz v high-throughput prostředí.

Závěr

FlipLC™ představuje inovativní přístup ke stanovení askorbové kyseliny v komplexních matricích. Díky paralelnímu systému kolonek je analýza rychlá, robustní a vysoce selektivní, aniž by bylo nutné složité čištění vzorku. Metoda významně prodlužuje životnost kolony a umožňuje univerzální aplikaci napříč různými typy vzorků.

Reference

• SIELC Technologies, Inc. FlipLC™. A New Method for Measuring Charged Analytes in Complex Mixtures. Part III. Wheeling, IL, USA, 2002–2018.