Advances in Downstream PAT for Biologics, Vaccines and Gene Vectors

Význam tématu

Real-time multi-angle light scattering (RT-MALS) poskytuje nepřetržité monitorování klíčových atributů biologických léčiv během downstream procesů a fill–finish. Umožňuje hodnotit molární hmotnost, velikost, konformaci, koncentraci částic a nálož genomu virů v reálném čase.

Cíle a přehled studie

Cílem je představit nové aplikace RT-MALS s ultraDAWN instrumentem a OBSERVER softwarem v laboratorní i výrobní praxi. Studie ilustruje využití technologie při purifikaci monoklonálních protilátek, adenovirové a AAV vektorů a ultrafiltraci.

Použitá metodika a instrumentace

RT-MALS kombinuje víceúhlové rozptylové měření světla s UV detekcí a softwarem OBSERVER. Instrumentace:

• ultraDAWN MALS
• OBSERVER software
• FPLC, TFF, homogenizér a doplňkové pumpy
• OPC-UA rozhraní pro procesní automatizaci

Hlavní výsledky a diskuse

V případě průtočné HIC chromatografie metoda umožnila detekci prahu pro sběr monomeru na základě hmotnostní průměrné molární hmotnosti. U purifikace adenovirů RT-MALS potvrdila konstantní velikost a určila titul offline v rekordním čase. Ultrafiltrace virálních vektorů byla monitorována stanovením titru a velikosti bez zpoždění procesu. Při obohacování AAV vektorů technologie přesně identifikovala frakce s vysokým poměrem plných kapsid.

Přínosy a praktické využití metody

RT-MALS poskytuje:

• Okamžitou informaci o kvalitě produktu (CQA)
• Optimalizaci doby sběru a výtěžku
• Redukci offline analytiky o týdny
• Zvýšení průtoků a konzistence v GMP prostředí

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace RT-MALS s dalšími PAT nástroji a AI pro prediktivní kontrolu, rozšíření na buněčné terapie a kontinuální výrobní linky, automatizace a digitalizace procesů.

Závěr

RT-MALS s ultraDAWN a OBSERVER představuje inovativní přístup k inline/online monitoringu biologik, zrychluje vývoj i výrobu a zajišťuje vysoce kvalitní a reprodukovatelné výsledky.

Reference

• Patel et al., mAbs 10(7):945-950 (2018)