SIMULTANEOUS MEASUREMENT OF ALDOSTERONE AND PLASMA RENIN ACTIVITY IN HUMAN SERUM USING LIQUID CHROMATOGRAPHY COUPLED TO TANDEM MASS SPECTROMETRY (LC-MS/MS) FOR CLINICAL RESEARCH

Význam tématu

Renin-angiotenzin-aldosteronový systém zajišťuje udržení krevního tlaku a objemu tekutin v organismu. Koncentrace aldosteronu a aktivita plazmatické reninové aktivity poskytují klíčové informace o stavu systému a efektu nových terapeutik v klinických studiích.

Cíle a přehled studie / článku

Práce představuje vyvinutí a validaci jediné LC-MS/MS metody pro souběžné stanovení aldosteronu a reninové aktivity (měřené jako angiotensin I) v lidské séru určenou pro klinický výzkum. Studie hodnotí analytickou výkonnost, přesnost a robustnost metody.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky séra byly připraveny manuálně a automatizovaně, zahrnovaly extrakci analyzovaných látek a chromatografické oddělení na UPLC. Měření se provádělo na tandemu hmotnostního spektrometru za použití vícestupňové fragmentace.
Instrumentace:

• UPLC systém ACQUITY I-Class
• Hmotnostní spektrometr Xevo TQ-XS
• Kvalifikační kolon XBridge C18

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala LOQ na úrovni obou analytů s malými posuny retenční doby pod 0,2 sekundy. Maticové efekty byly minimalizovány a potvrzeny pomocí raincloud analýzy. Přesnost a opakovatelnost vykázala koeficient variace ≤15 % v průběhu pěti dní a více inkubačních časů. Při porovnání s referenčními metodami byla u aldosteronu zjištěna střední systematická odchylka –6,0 %, u reninové aktivity +21,4 %. Studie stability ukázala, že analyty zůstávají stabilní po opakovaném zmrazovacím cyklu až 20 dní. Automatizovaná příprava vzorků snížila procentuální variabilitu a zvýšila průchodnost analýz.

Přínosy a praktické využití metody

Jednotlivý test pro stanovení klíčových složek RAAS umožňuje efektivnější využití instrumentace a snížení nákladů. Metoda nabízí vysokou propustnost a je kompatibilní s existujícími platformami v laboratoři klinického výzkumu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možné směry dalšího rozvoje zahrnují multiplexní analýzy dalších RAAS přenašečů, miniaturizaci přípravy vzorků, integraci do automatizovaných platforem point of care a využití umělé inteligence pro analýzu dat.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda splňuje požadavky na citlivost, přesnost a stabilitu stanovení aldosteronu a reninové aktivity v klinických vzorcích. Nabízí robustní nástroj pro výzkum a vývoj nových terapeutik ovlivňujících RAAS systém.

Reference

• Oliveiro G, Burgos R, Foley D, Bosh G, Davey L. Simultaneous measurement of aldosterone and plasma renin activity in human serum using LC-MS/MS for clinical research. Waters Corporation 2024