Analysis of alcohols in blood/plasma

Význam tématu

Analýza alkoholů v krvi a plazmě je zásadní pro toxikologické a klinické vyšetření. Rychlé a přesné stanovení koncentrace acetaldehydu, methanolu, ethanolu, acetonu a isopropanolu umožňuje správnou diagnózu a rozhodnutí v soudně lékařské praxi i při lékařském záchytu intoxikace.

Cíle a přehled studie

Cílem byla optimalizace plynové chromatografie pro separaci pěti hlavních alkoholu v biologických vzorcích během tří minut. Studie demonstruje rychlé screeningové oddělení a kvantifikaci s využitím interního standardu a externí kalibrace.

Použitá metodika a instrumentace

Postup analýzy zahrnoval:

• Plynovou chromatografii s širokým otvorem kolony CP-Sil 19 CB o rozměrech 0,53 mm x 25 m
• Teplotní podmínky: izotermicky při 50 °C s programem nástřelu 20 °C za minutu pro screening metody
• Použití dusíku jako nosného plynu
• Splitový vstřik split s poměrem 30 : 1, teplota injektoru 220 °C
• Detekce plamenovou ionizační detektorem FID při 200 °C
• Příprava vzorků: deproteinace s pufrem, přídavek interního standardu isopropanolu a centrifugace

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla baseline separace pěti alkoholu za přibližně tři minuty. Retenční časy jednotlivých komponent se pohybovaly v rozmezí tolerancí pro rychlý screening. Detekční limity pro methanol a ethanol byly kolem 0,3 g l na bázi signál šum tři. Ukázkové analýzy vzorků A a B potvrdily schopnost stanovovat nízké i vysoké koncentrace: vzorek A 0,22 g l, vzorek B 2,90 g l.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlost výkonu a přímá příprava vzorku zkracují dobu analýzy, což ocení především forenzní laboratoře a klinické toxikologické centra. Splitový vstřik s interním standardem zajišťuje robustní kvantifikaci bez zdlouhavé derivatizace.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším směrem je automatizace přípravy vzorků, použití menších kapilárních kolon pro zkrácení doby analýzy a kombinace s hmotnostní detekcí pro potvrzení identifikace. Možná je adaptace na bodové odběry a mikroskopické objemy pro urgentní diagnostiku.

Závěr

Navržená GC metoda na kolonce CP-Sil 19 CB umožňuje rychlé, spolehlivé a citlivé stanovení běžných alkoholů v krvi a plazmě. Díky jednoduché přípravě vzorků a robustní detekci je vhodná pro forenzní i klinické aplikace.

Reference

Application Note Agilent Technologies první vydání před rokem 2010