Routine Quantitation of 17 Underivatized Amino Acids by LC/MS

Význam tématu

Aminokyseliny představují klíčové složky nutraceutik a doplňků stravy, jejichž globální trh roste rychlostí přes 9 % ročně. Přesná kvantifikace složení na etiketách výrobků je pro zajištění kvality, účinnosti a bezpečnosti nezbytná.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout rychlou, citlivou a nákladově efektivní metodu pro současné stanovení 17 derivátovaných aminokyselin bez nutnosti chemické derivatizace. Metoda používá jednu injekci na přístroji Agilent InfinityLab LC/MSD iQ a byla validována v laboratorních podmínkách.

Použitá metodika a instrumentace

Pro chromatografii byl použit Agilent 1290 Infinity II LC systém s kolonkou HILIC-Z (3,0 × 150 mm, 2,7 µm). Mobilní fáze obsahovala 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě (kanál A) a acetonitril (kanál B) se gradientem od 5 % do 45 % acetonitrilu během 10 minut při průtoku 0,6 mL/min. Detekce probíhala v režimu SIM na Agilent InfinityLab LC/MSD iQ s ESI v pozitivním módu. Optimalizované parametry zdroje zahrnovaly teplotu 325 °C, průtok plynu 11 L/min, napětí kapiláry 3 500 V a tlak mlžení 50 psi.

Hlavní výsledky a diskuse

Lineární rozsahy stanovení se pohybovaly od 10 do 1 000 pmol/µL s koeficienty lineárity R2 > 0,99 pro všechny aminokyseliny. Relativní odchylky retenční doby byly menší než 0,4 % a koncentrace vykazovaly přesnost ±3 % RSD. Testy v matrix (voda a vzorky doplňků stravy) potvrdily vysoké zotavení (100–112 %) a absenci významných matrix efektů. Metoda spolehlivě rozlišila izomery L-leucin a L-isoleucin.

Přínosy a praktické využití metody

• Žádná derivatizace: zkrácení doby přípravy vzorku.
• Jednoinjekční analýza 17 aminokyselin: zvýšení propustnosti laboratoře.
• Vysoká citlivost, přesnost a robustnost: vhodné pro QA/QC v potravinářství a farmaceutickém průmyslu.
• Možnost ověřit složení doplňků stravy a nutraceutik rychle a nákladově efektivně.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj automatizace přípravy vzorků a rozšíření spektra analyzovaných aminokyselin či metabolit. Integrace metody do vysokopropustných (high-throughput) laboratoří a klinických aplikací, sledování metabolických profilů a kvality potravinářských produktů.

Závěr

Popsaná LC/MS metoda na přístroji Agilent InfinityLab LC/MSD iQ umožňuje rychlou, přesnou a opakovatelnou kvantifikaci 17 podjednotkových aminokyselin bez derivatizace, čímž šetří čas i náklady a podporuje efektivní ověřování složení doplňků stravy.

Reference

1. Future Market Insights: Food Amino Acids Market to 2033. Globene­wswire, 2023.
2. AminoAcidsGuide.com, průvodce aminokyselinami, 2023.
3. Cleveland Clinic: Amino Acids. The Cleveland Clinic Foundation, 2021.
4. Kapalka GM. Nutritional and Herbal Therapies for Children and Adolescents. Academic Press, 2010.
5. Shimadzu: Analytical Methods for Amino Acids. Shimadzu Corporation, 2023.