Achieving Method Modernization with the New Liquid Chromatographic Gradient Method Allowances Provided by USP General Chapter <621> Chromatography and the Arc™ HPLC System

Význam tématu

Chromatografické metody podle USP <621> jsou základem farmaceutické kontroly kvality. Modernizace jejich parametrů umožňuje zkrátit dobu analýzy, snížit spotřebu elučního činidla a zvýšit flexibilitu volby sloupců.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo aplikovat povolené úpravy gradientní metody podle USP <621> na monografii abacavir sulfátu za použití moderního systému Arc HPLC. Studie demonstrovala přechod na větší průměry sloupců s menšími částicemi a využití vyšších provozních tlaků.

Použitá metodika a instrumentace

• Instrumentace: Arc HPLC System s 2998 Photodiode Array detektorem, Empower 3 CDS.
• Sloupce: Symmetry C18 (3.9×150 mm, 5 µm; 4.6×150 mm, 5 µm; 4.6×100 mm, 3.5 µm), Waters XBridge C18 (4.6×100 mm, 3.5 µm), XSelect HSS T3 (4.6×150 mm, 3.5 µm).
• Úpravy metodických parametrů: přepočty průtoku, objemu injekce a gradientních časů dle rovnic USP <621>, zajištění poměru L/dp v povoleném rozsahu.
• Vzorek: systémová zkušební směs nečistot abacavir sulfátu (USP).

Hlavní výsledky a diskuse

• Všechny upravené metody splnily rozlišitelnost kritického páru nečistot (R ≥ 1,5).
• Relativní časy zadržení (RRT) se shodovaly s monografií pro stejné substituenty stacionární fáze, při odlišných substituentech byly ověřeny PDA spektrální analýzou.
• Systém Arc HPLC podporuje tlak až 9500 psi, což umožnilo použití sloupců s menšími částicemi bez překročení tlakového limitu.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení doby analýzy a nižší spotřeba elučního činidla.
• Snížení objemu vzorku při zachování citlivosti a rozlišitelnosti.
• Možnost širšího výběru moderních sloupců díky vyššímu provoznímu tlaku.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Přechod k UHPLC pro ještě rychlejší a citlivější separace.
• Integrace digitálních nástrojů pro automatickou optimalizaci gradientů.
• Rozšíření přístupu na další farmaceutické monografie a komplexní biologické vzorky.

Závěr

Modernizace gradientní metody podle USP <621> na systému Arc HPLC pro abacavir sulfát potvrzuje zachování systémové vhodnosti a přináší významné úspory času, objemu injekce i spotřeby elučních činidel.

Reference

1. USP General Chapter <621> Chromatography, Official Date 01-Dec-2022.
2. Abacavir Sulfate Monograph, Official 01-May-2020.
3. Preparative OBD Column Calculator, Waters, accessed 1/15/2023.
4. Columns Calculator 2.0, Waters, accessed 1/15/2023.