Fast, reproducible UHPLC-UV determination of dyes found in beverages

Význam tématu

Reverzní fáze UHPLC-UV analýza potravinářských barviv v nápojích přináší rychlou, citlivou a reprodukovatelnou metodu pro kontrolu kvality, bezpečnosti potravin a dodržování legislativních limitů. Důležitá je také schopnost plynulého přenosu metody mezi různými systémy, minimalizující nutnost revalidace a zachovávající konzistenci výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo demonstrovat bezproblémový přenos separační metody z HPLC systému UltiMate 3000 RS na UHPLC Vanquish Flex při použití kolony Acclaim PolarAdvantage II (PA2) 3 µm. Studie se zaměřila na rychlé oddělení devíti častých potravinářských barviv za méně než pět minut se zachováním přesnosti retenčních časů.

Použitá metodika a instrumentace

• Křemíková kolona Acclaim PA2, 3.0 µm, 75 × 3.0 mm
• Mobilní fáze A: 20 mM fosforečnan amonný v pH 8.8; fáze B: stejný pufr/ACN 50:50 (v/v)
• Gradient: 0–3,5 min lineární přechod z 12 % na 100 % B, návrat do výchozího stavu v 4,6 min
• Průtok 0,71 mL/min, teplota 30 °C, injekce 3 µL, detekce UV 254 nm
• Standardy devíti barviv v mísící směsi (10 µg/mL každé)
• UltiMate 3000 RS: LPG-3400RS pumpa, WPS-3000TRS autosampler, TCC-3000RS termostat, DAD-3000RS detektor s 13 µL flow cell
• Vanquish Flex: quaternární pumpa VF-P20-A, modul VF-S01-A, Split Sampler FT, Column Compartment H, Active Pre-heater, DAD HL a LightPipe™ 2 µL flow cell

Hlavní výsledky a diskuse

Obě konfigurace dosáhly plného rozlišení devíti barviv do přibližně čtyř minut. Plynulý přenos metody nevyžadoval úpravy objemu prodlevy gradientu. Retenční časy byly srovnatelné, přičemž Vanquish Flex ukázal až 80% snížení RSD retenčního času pro indigokarmín díky technologii SmartInject a vylepšené pumpě. Celkově Vanquish Flex vykázal nižší variabilitu oproti UltiMate 3000 RS.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá analýza (<5 minut) pro rutinní QA/QC
• Vysoká přesnost a opakovatelnost retenčních časů
• Snížení tlakových rázů a prodloužení životnosti kolony
• Jednoduchý přenos metody mezi různými systémy

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření metody na další třídy analytů, integrace s hmotnostní spektrometrií a automatizovanými přípravnými linkami, využití strojového učení pro optimalizaci podmínek a rozvoj miniaturizovaných, inline ředicích systémů pro ještě rychlejší analýzy.

Závěr

UHPLC-UV metoda s kolonu Acclaim PA2 na přístroji Vanquish Flex prokázala vysokou rychlost, reprodukovatelnost a bezproblémový přenos z UltiMate 3000 RS. Zlepšené retenční časy a robustnost komponent podporují spolehlivost dat a usnadňují rutinní nasazení v laboratořích.

Reference

1. Lamb A. Fast, reproducible UHPLC-UV determination of dyes found in beverages. Thermo Fisher Scientific Application Note 21733, 2017.