HPLC
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Rozbor barviv v potravinách a nápojích je klíčový pro zajištění bezpečnosti spotřebitelů, dodržování legislativních limitů a odhalování neoprávněného použití zakázaných látek. Rychlá a spolehlivá metoda HPLC umožňuje kontrolu jak schválených, tak nelegálních barviv ve vzorcích s vysokou propustností analýz.
Cíle a přehled studie
Cílem studie bylo vyvinout a ověřit rychlou reverzní chromatografickou metodu pro separaci a kvantifikaci deseti běžných potravinářských barviv za méně než pět minut. Metoda byla aplikována na reálné vzorky nealkoholických nápojů a gelatiny, aby bylo možné detekovat povolená i zakázaná barviva.
Použitá metodika a instrumentace
- Kolona: Acclaim PA2 (3 µm, 3×75 mm) odolná vůči pH 8,8
- Mobilní fáze: A) 20 mM (NH₄)₂HPO₄ pH 8,8; B) 50 % A v acetonitrilu (gradient 12 % → 100 % B za 3,5 min)
- Fázový gradient: 12 % B (–3 min) → 100 % B (3,5 min) → návrat na 12 % B (0,1 min)
- Systém: UltiMate 3000 RSLC (binary pumpa, split-loop sampler, termostatická kolona, DAD detektor)
- Detekce: UV při 254 nm, spektrální skenování 200–800 nm
Hlavní výsledky a diskuse
- Oddělení deseti barviv (tartrazin, amaranth, indigo carmine, new coccine, sunset yellow FCF, fast green FCF, eosin Y, erythrosin, phloxine B, bengal rose B) pod 5 min
- Vysoká čistota vrstev (match > 998, PPI > 300) a rozlišení (> 2,8) zaručující spolehlivou identifikaci
- Lineární kalibrace 1–30 mg/L (R² > 0,999) pro všechna barviva
- Aplikace na reálné vzorky: tartrazin v žlutých sportovních nápojích, sunset yellow ve sportovních a nealko nápojích, tartrazin + fast green ve zeleném nealku, nelegální new coccine v červené gelatíně
- Obnova po přídavku standardů 82–100 %, RSD replikací < 1 %
Přínosy a praktické využití metody
- Výrazné zkrácení doby analýzy s vysokou propustností vzorků
- Možnost rutinní kontroly kvality potravin a nápojů v souladu s legislativou
- Detekce zakázaných barviv pro zachování bezpečnosti spotřebitele
Použitá instrumentace
- Chromatografický systém UltiMate 3000 Rapid Separation LC
- Kolona Acclaim PA2, 3×75 mm, 3 µm
- Detektor DAD-3000RS
- Software Chromeleon 6.80 SR7
Budoucí trendy a možnosti využití
- Zrychlení analýzy pomocí menších částic a kratších kolon
- Integrace s LC–MS pro vyšší selektivitu a nižší detekční limity
- Automatizace přípravy vzorků a online monitoring kvality
Závěr
Navržená HPLC metoda s polar-embedded fází PA2 umožňuje rychlou, citlivou a spolehlivou analýzu potravinářských barviv v čase pod pět minut. Je vhodná pro rutinní i výzkumné laboratoře, přičemž umožňuje odhalit jak schválená, tak zakázaná barviva.
Reference
1. Dionex Corporation. Application Note 245: Fast HPLC Analysis of Dyes in Foods and Beverages. 2016.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.