Fast screening of mobile and stationary phases with the Agilent 1290 Infinity LC and seamless method transfer to an Agilent 1200 Series LC using ISET

Význam tématu

V farmaceutické oblasti je při vývoji a validaci analytických metod nezbytné hbitě identifikovat optimální chromatografické podmínky a zajistit jejich přenos mezi různými přístroji bez ztráty kvality separace.

Cíle a přehled studie/článku

Cílem bylo demonstrovat rychlý screening kombinací stacionárních a mobilních fází na Agilent 1290 Infinity LC s využitím Method Scouting Wizard a následný bezproblémový přenos optimalizované metody na konvenční Agilent 1200 Series LC pomocí ISET.

Použitá metodika

Metoda zahrnovala:

• Screening pěti ZORBAX RRHT sloupků (SB-C8, SB-CN, SB-Phenyl, Extend-C18, SB-C18) 2.1×50 mm, 1.8 µm
• Testování mobilních fází při pH 2.1, 3.35, 4.52, 6.4 a 11
• Gradient 5–65 % organiky za 5 minut
• Automatizované pořizování sekvencí a vyhodnocení pomocí OpenLAB CDS a Intelligent Reporter
• Převod UHPLC metody na HPLC (4.6×150 mm, 5 µm) přes nástroj Method Transfer and Cost Savings Calculator
• Jemné doladění gradientů a teploty konvenční metody
• Simulace cílového zařízení Agilent 1200 Series LC prostřednictvím ISET

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity LC System (G4220A, G4226A, G1330B, G1316C, G4212A) s ISET
• Agilent 1200 Series Binary LC (G1312A, G1329A, G1330A, G1316A, G1322A, G1315B)
• Software OpenLAB CDS ChemStation C.01.04 a Method Scouting Wizard A.02.02

Hlavní výsledky a diskuse

Optimum separace degradátů metoprololu bylo dosaženo na sloupku SB-C18 při pH 2.1 na UHPLC sloupku 2.1×50 mm za 5 min. Po převodu na konvenční HPLC sloupek 4.6×150 mm/5 µm a optimalizaci gradientu a teploty byla obdobná separace dosažena za 21 min. Simulace ISET ukázala maximální odchylku retenčních časů 1.5 % a rozlišení 3 % ve srovnání se skutečným průběhem na Agilent 1200 Series LC.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zrychlení vývoje a validace metod
• Snadný a bezpečný transfer UHPLC metod na konvenční LC
• Snížení spotřeby organických rozpouštědel
• Implementace v QA/QC laboratořích bez UHPLC přístrojů

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření inteligentní emulace dalších LC systémů, využití umělé inteligence pro predikci optimálních chromatografických podmínek a širší aplikace Quality by Design v celoživotním cyklu metody.

Závěr

Demonstrované workflow pro screening, přenos a validaci metod mezi UHPLC a HPLC potvrzuje vysokou efektivitu, spolehlivost a úsporu prostředků s využitím Agilent 1290 Infinity LC a ISET.

Reference

1. A. G. Huesgen, Method development on the Agilent 1290 Infinity LC using Intelligent System Emulation Technology (ISET) with subsequent transfer to an Agilent 1100 Series LC, Agilent Application note, 5990-9715EN, 2012.